缺氧微环境下ERMP1在胰腺癌侵袭转移中的研究

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目的探究缺氧微环境条件下ERMP1蛋白在胰腺癌中的表达及其与临床病理和预后的相关关系,ERMP1对胰腺癌细胞侵袭转移的影响,对提高胰腺癌疗效具有重要的理论指导意义和临床应用价值。方法1、通过免疫组化方法检测在正常胰腺组织和胰腺导管癌组织(PDAC)中ERMP1蛋白的表达情况,应用统计软件分析临床病理资料相关性。2、在常氧和缺氧(氧分压<1%,48h)状态下培养的不同转移潜能胰腺癌细胞株AsPC-1、Panc-1和Capan-2(高/中/低),通过实时定量PCR和Western blot检测ERMP1在2种不同培养状态下三株胰腺癌细胞中转录水平和蛋白水平的表达情况。3、利用CRISPR/Cas9基因编辑系统构建Panc-1细胞ERMP1基因敲除的稳定细胞株,观察缺氧状态下ERMP1下调对胰腺癌细胞侵袭转移的影响。结果1、通过免疫组化实验我们发现在胰腺导管癌组织中ERMP1蛋白处于高表达状态,在正常胰腺组织中呈现为低表达或不表达的情况;ERMP1的表达与TNM分期和淋巴结转移有统计学意义,与临床预后也有统计学意义。2、在缺氧和常氧两种培养状态下,发现缺氧状态下培养的胰腺癌Panc-1细胞的侵袭转移能力强于常氧状态下的培养的胰腺癌Panc-1细胞;且在两种不同培养状态下ERMP1下调后胰腺癌Panc-1细胞的侵袭转移能力都出现明显下调。结论1、ERMP1在PDAC组织中存在异常表达情况,并与PDAC的生物学行为有相关性,尤其是淋巴结转移和TNM分期,ERMP1是PDAC患者术后独立的预后因素。2、缺氧增加了胰腺癌细胞中ERMP1的表达;ERMP1下调后胰腺癌细胞的侵袭转移能力明显下调,说明ERMP1对胰腺癌细胞的侵袭转移可能有一定的影响。
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