基于多糖纳米纤维的骨组织工程支架的制备和性能研究

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天然多糖具有良好的生物相容性、生物可降解性能和潜在的生物活性。静电纺丝技术制备的纳米纤维结构类似于天然的细胞外基质,并且具有高孔隙率、孔隙互通等特点。静电纺多糖纳米纤维结合了多糖的材料特点和纳米纤维的结构特点,在骨组织工程领域具有很大的应用潜力。目前骨组织工程领域可用的多糖纳米纤维多为壳聚糖、海藻酸盐纳米纤维,支架品种、性能单一,这限制了应用的效果。本课题组在前期发展了新型的果胶多糖纳米纤维和高碘酸氧化-己二酸二酰肼交联的制备耐水的多糖纳米纤维的方法。本论文在前期工作的基础上,发展新型的基于多糖纳米纤维的骨组织工程支架材料。具体内容与结果如下:第一部分是,通过浓缩模拟体液培养方法,发展了具有骨诱导能力的果胶纳米纤维-羟基磷灰石纳米晶复合支架。对高酯、低酯和酰胺化低酯三种果胶的纳米纤维进行骨细胞相容性评价,结果表明这三种果胶纳米纤维对骨细胞都无显著毒性,并能够支持骨细胞的黏附和增殖,适宜用于羟基磷灰石纳米晶的沉积。通过对低酯果胶纳米纤维进行浓缩模拟体液培养,成功制备了果胶纳米纤维-羟基磷灰石纳米晶复合支架。复合支架纤维直径介于1.8~15.7μm,羟基磷灰石晶体片面积介于0.3~4.2μm~2,晶体片厚度介于50~150 nm。随着浓缩模拟体液培养时间增加,纤维变粗,晶体片尺寸和厚度增加,复合支架结晶性增强,杨氏模量减小,极限拉伸应变增加。复合支架在模拟体液中浸泡后,在支架表面和纤维间隙沉积新的羟基磷灰石晶体,纤维质量增加,说明复合支架能够诱导矿物沉积,是一种有潜力的骨组织工程支架材料。第二部分是,使用高碘酸氧化-己二酸二酰肼交联的方法,成功制备了新型的交联普鲁兰纳米纤维支架。用高碘酸钠对普鲁兰进行氧化,得到氧化度为16%~50%的氧化普鲁兰。普鲁兰的氧化度随着高碘酸钠的使用量的增加而增加,分子量随之降低。己二酸二酰肼能够成功交联氧化普鲁兰纳米纤维,在普鲁兰分子链之间形成腙键,实现纤维的交联。交联普鲁兰纳米纤维支架的力学强度与普鲁兰的氧化程度有关。随着普鲁兰的氧化程度的增加,纤维支架的杨氏模量呈现先减小后增加的趋势,极限拉伸应变则先增加后减小。交联普鲁兰纳米纤维支架稳定性良好,在模拟体液中培养4周后质量仍保持63%以上,纤维形貌不变。交联普鲁兰纳米纤维支架对MC3T3-E1小鼠原成骨细胞无明显毒性,并支持其粘附与增殖。这种新型的交联普鲁兰纳米纤维支架具有可调的力学强度、良好的稳定性和骨细胞相容性,可能应用于骨组织工程领域。总的来说,本论文一方面发展了具有骨诱导能力的果胶纳米纤维-羟基磷灰石纳米晶复合支架,另一方面发展了力学性能可调,稳定性和骨细胞相容性良好的新型普鲁兰纳米纤维支架,为提高多糖纳米纤维在骨组织工程领域的应用效果奠定了基础。
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