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ADAMs是一类具有跨膜结构域的细胞表面糖蛋白,由于ADAM包含有两个重要的结构域(脱整联蛋白结构域和金属蛋白酶结构域),ADAM因此命名。ADAMs在生殖发育过程中具有重要的作用,包括蛋白水解,精卵融合等功能,此外,ADAM对生物的发育,炎症反应,细胞间及细胞与基质问的粘附,迁移也具有调控作用,ADAM对多种发育过程均有调控,本文首次在中华绒鳌蟹中验证了ADAM基因的存在,并且探索它们在精子发生过程中的作用。本文以中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)精巢和副性腺转录组数据中获得的ADAM10和ADAM17基因部分片段为基础,通过已有序列拼接和RACE技术,首次获得了中华绒螯蟹ADAM10和ADAM17基因(Es-ADAMs基因)的cDNA序列,其中ADAM10的开放阅读框为2789bp,编码929个氨基酸,ADAM17开放阅读框为2274bp,编码的757个氨基酸。通过生物信息学分析Es-ADAMs蛋白的功能域,ADAM10、ADAM17蛋白都具有金属蛋白酶结构域的保守识别序列"HEXGHXXGXXHD"和去整合素结构域识别序列‘’X-D/E-ECD"。系统进化树构建显示Es-ADAMs蛋白首先与昆虫纲等节肢动物聚类,然后依次和其他无脊椎动物聚类,与传统的分类学结果基本一致。实时荧光定量PCR结果表明,ADAM10、ADAM17基因在中华绒螯蟹不同组织中均广泛表达,且在精巢、卵巢和副性腺等组织中表达相对较高。检测精巢不同发育时期的Es-ADAM基因的表达水平发现,ADAM17基因在精子大量成熟的精细胞期表达量显著上升,而Es-ADAM10表达变化则不显著,表明Es-ADAM基因可能一定程度上都参与中华绒螯蟹精巢发育和精子发生的调控过程。运用免疫荧光技术对Es-ADAM蛋白在精巢中进行定位,不仅证明Es-ADAM基因在蛋白水平上具有表达,同时也能定位Es-ADAM10、17在精巢中定位于细胞膜上。利用不同浓度(0,30μM,60μM,90μM,120μM)和不同时间梯度(0,6h,12h,18h,24h)的Etoposide诱导剂对驯养一周的中华绒鳌蟹进行诱导处理,实时定量PCR结果显示在90μM浓度下,处理12小时后,两基因表达量均达到最高。然而ADAM10在基因水平上的表达量随着精细胞的死亡的增加表现较为平缓,而ADAM17基因的表达量随着精细胞的凋亡而显著增加；然而在蛋白水平上,ADAM10和ADAM17蛋白的表达量都随着精细胞的死亡数目增加而增加,因此ADAM10和ADAM17基因可能都参与了中华绒螫蟹精子质量的调控,保证了精子发生过程的顺利进行,但两个基因的表现差异可能暗示着调节机制有所不同。综上所述,本研究首次在中华绒螯蟹中报道了ADAM蛋白,分析了它们的结构域,进化树,蛋白定位和相关的功能分析,然而其功能的机制需要进一步深入研究。这些研究结果将对进一步了解中华绒螯蟹ADAM家族其他基因的功能提供重要的参考,并为ADAM蛋白家族其他亚型的基因研究提供新的思路。