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目的建立荧光定量RT-PCR检测WT1基因的方法,探讨WT1基因在各类白血病的表达,WT1基因表达与临床疗效和预后的关系,以及在白血病微小残留病检测中的作用。方法RT-PCR分别扩增K562细胞WT1基因及β-actin基因,凝胶切割并回收、纯化,经紫外分光光度计定量后作为标准模板,建立荧光定量RT-PCR扩增体系。用荧光定量RT-PCR方法检测55例初发白血病患者外周血及10例正常人外周血的WT1基因表达,跟踪20例急性白血病患者外周血WT1基因表达。结果1.白血病初治组(40例ANLL、15例ALL)与正常人外周血WT1基因表达有显著差异(p<0.01)。2. 50例急性白血病患者中(38例ANLL、12例ALL),完全缓解率为66%,完全缓解组与未缓解组WT1表达水平有显著差异(p<0.05)。3. 50例急性白血病患者中(38例ANLL、12例ALL),WT1≤-2.1675组生存期长于WT1>-2.1675组(P<0.05)。4.初治组和复发组WT1基因表达水平高于完全缓解组(P<0.05);初治组和复发组之间无显著性差异(P>0.05)。5.跟踪检测20例急性白血病患者外周血WT1基因表达,其中7例复发,5例在临床复发前2-3月,WT1水平明显增高,至少上升0.8个对数级别。结论1.与正常人外周血比较, WT1在各类急性白血病外周血中呈高度表达。2. WT1表达水平与疗效、预后负相关。3.急性白血病患者WT1基因表达水平与疾病的病程相关,对白血病患者外周血WT1基因表达进行定量分析,可用于微小残留病的监测。