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菊花为菊科植物菊(Chrysanthemum morifofium Ramat)的干燥头状花序。原主产于浙江桐乡、海宁等地,自1995年以来江苏省的菊花生产得到了飞速发展,生产水平也有了大幅度提高,年产量达到3000 吨左右,约占我国药用菊花市场的50%以上。
为了综合开发菊花可利用资源,我们结合体内和体外实验考察菊花及其茎叶化学成分的抗氧化能力、对耐缺氧能力的影响以及对心肌细胞的保护作用。实验表明菊花的总黄酮部位能明显升高衰老模型小鼠血清及脑组织中的超氧化物歧化酶(SOD)活力,同时显著降低血清及脑组织中过氧化脂质(MDA)水平,提示有一定的抗氧化作用。同时对抗异丙肾上腺素所致心肌缺血大鼠的心电图T波抬高KS-T段的异常偏移,使血清LDH降低,并可增加心肌组织SOD的活力,减少MDA生成,提示菊花总黄酮对大鼠急性心肌缺血有一定的保护作用;菊花茎叶的氯仿萃取部位明显延长小鼠在常压下耐缺氧时间提高耐缺氧能力。
活性部位通过硅胶、Sephadex LH-20反复柱层析、纯化,从菊花及其茎叶的活性部位中分离得到 15个化合物,利用波谱方法分离鉴定为香叶木素(ctuysoeriol,1),木犀草素(1uteolin,2),芹菜素(apigenin,3),香叶木素7-O-β-D-葡萄糖苷(chrysoeriol 7-O-β-D-glucopyranoside,4),木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(1uteolin 7-O-β-D-glucopyranoside,5),金合欢素7-O-β-D-葡萄糖苷(acacetin 7-O-β-D-glucopyranoside,6),刺槐营(acacetin7-O-β-D-glucepyranosyl(6→1)-α-L-rhamnopyranoside,7),金合欢素7-O-(6"-O-乙酰)-β-D-葡萄糖苷(acacetin7-O-(6”-O-acetyl)-β-D-glucopyranoside,8),山奈酚(kaempferol,9),金合欢素(acacetin,10),异泽兰黄素(eunatilin,11),大黄素(emodin,12),大黄酚(chrysophanol,13),大黄素甲醚(physcion,14)和香叶木素7-O-(6”-O-乙酰基)-β-D-葡萄糖苷[chrysoeriol 7-O-(6"-O-acety1)-β-D-glucopyranoside,15]。其中化合物8~14 均为首次从菊花中分离得到,化合物15为新化合物。 对单体成分进行追踪活性筛选,在心肌细胞保护实验中化合物2(木犀草素)不同剂量(0.32mg/L、0.95mg/L、2.86mg/L)可以降低乳酸脱氢酶(LDH)活性及丙二醛(MDA)含量,增加超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明木犀草素对乳鼠心肌细胞损伤有保护作用:化合物7-O-(6"-O-乙酰)-β-D-葡萄糖苷高浓度及木犀草素高、低浓度均可对抗异丙肾上腺素所致乳鼠心肌细胞的损伤,使细胞上清液中LDH降低,对乳鼠心肌细胞损伤有一定的保护作用。体外抗氧化实验结果表明:结果表明化合物12和化合物14对H<,2>O<,2>诱导的大鼠红细胞溶血有明显的抑制作用,化合物13(大黄酚)高剂量组可能有细胞毒作用和促进溶血作用。化合物12(大黄素)和化合物14(大黄素甲醚)对大鼠肝匀浆自发性氧化的MDA含量有明显的抑制作用。
运用RP-HPLC色谱法,建立了木犀草素、金合欢素-7-O-β-D葡萄糖苷、木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷、金合欢素-7-O-(6"-O-鼠李糖)-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法。
本文结合植物化学和现代药理实验,筛选菊花中抗衰老和心血管方面活性物质,并建立菊花质量评价方法,为菊花产品的丌发提供详实的理论和实验依据。