论文部分内容阅读
WNT信号途径研究主要集中在胚胎发育方面,但近年来发现其还参与成年后的许多疾病过程,特别是在肿瘤方面。丝/苏氨酸蛋白激酶-糖原合成酶激酶-3β在该信号途径中通过磷酸化作用使β-连接素下调,是该信号途径中起着关键作用的负性调节酶,被认为是一种潜在的肿瘤抑制因子。锂是一种碱性轻金属元素,最初是作为精神障碍性疾病的治疗药物,近年发现其还具有其它广泛的生物学效应,抑制糖原合成酶激酶-3即为其中之一。
目的:本实验利用氯化锂作用于A549细胞,以研究氯化锂以及WNT信号途径在体外条件下对人肺腺癌A549细胞的增殖和凋亡的影响。
方法:采用体外细胞培养,设对照组(单细胞悬液)、实验1组(单细胞悬液+2.5mmol/L氯化锂处理)、实验2组(单细胞悬液+5.0mmol/L氯化锂处理)、实验3组(单细胞悬液+10.0mmol/L氯化锂处理),以噻唑蓝(MTT)比色试验为指标观察氯化锂对人肺腺癌A549细胞增殖的影响;免疫细胞化学实验检测Caspase-3表达测定肿瘤细胞凋亡;使用流式细胞术检测对细胞周期的影响。
结果:
①不同浓度的氯化锂(2.5-10mM)对A549人肺腺癌细胞均具有抑制增殖的作用,并且这种增殖抑制作用呈剂量依赖关系;
②A549人肺腺癌细胞的Caspase-3表达随氯化锂浓度增加而增强。
③细胞周期检测发现10mM氯化锂作用24小时后,与对照组比较实验组A549细胞出现G0/G1期细胞比例增加,而S期细胞比例减少。
结论:
①氯化锂直接对A549人肺腺癌细胞有抑制增殖作用,使细胞阻滞在G0/G1期,且能增加caspase-3阳性细胞表达从而可能诱导细胞凋亡;
②WNT经典信号途径途径对肺癌细胞发生中的作用可能并不十分重要;
③试验结果提示GSK-3在治疗非小细胞肺癌发面可以作为一个潜在的药物作用靶点。