【摘 要】
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牛支原体可引起牛的支气管肺炎、乳腺炎和关节炎等多种疾病,目前已在世界范围内广泛传播,给各国养牛业造成了重大经济损失。为了解新疆南疆部分地区牛场牛支原体的流行情况,本研究于2019年至2020年,在新疆阿克苏、和田、巴州、图木舒克四个地区的10个规模化牛场随机采集牛鼻拭子共350份,收集到病死犊牛肺脏样本3份。使用牛支原体特异引物和支原体属通用引物对采集的样本进行PCR检测,将PCR阳性样本进行测序
【基金项目】
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塔里木畜牧科技兵团重点实验室开放课题“新疆南疆规模化场牛支原体感染情况调查及灭活疫苗田间试验”的部分研究成果（项目编号:HS201802）课题主持人:武军元副教授（塔里木大学）；
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牛支原体可引起牛的支气管肺炎、乳腺炎和关节炎等多种疾病,目前已在世界范围内广泛传播,给各国养牛业造成了重大经济损失。为了解新疆南疆部分地区牛场牛支原体的流行情况,本研究于2019年至2020年,在新疆阿克苏、和田、巴州、图木舒克四个地区的10个规模化牛场随机采集牛鼻拭子共350份,收集到病死犊牛肺脏样本3份。使用牛支原体特异引物和支原体属通用引物对采集的样本进行PCR检测,将PCR阳性样本进行测序,使用生物分析软件MEGA、DNA star对所得序列进行分析,并基于支原体的16S r RNA基因序列构建系统进化树;使用支原体培养基对支原体属PCR检测为阳性的样本进行病原分离培养,并使用光学显微镜对分离株菌落形态进行观察,之后再次采用PCR方法进一步确定分离株种属。PCR检测结果显示,在350份鼻拭子中,共检测出牛支原体阳性样本80份、支原体属阳性样本238份;四个地区牛支原体阳性率分别为23.93%、26.04%、20%、19.44%,牛支原体总阳性率为22.86%;支原体阳性率分别为76.07%、58.33%、66.15%、69.44%,支原体属总阳性率为68.00%;3份病死犊牛肺脏样本均为牛支原体PCR阳性,犊牛牛支原体阳性率高于成年牛。系统发育分析显示,本研究所得支原体16S r RNA基因序列可归为3种,分别为牛支原体、牛鼻支原体和牛眼支原体,其中牛支原体序列与CQ-W70株和PG45株亲缘关系较近,牛鼻支原体序列与GS01和PG43株亲缘关系较近,牛眼支原体序列与M165/69株在同一分支。支原体分离结果显示,从支原体属PCR阳性样本中共分离到15株支原体。参考Gen Bank中公布的相关序列对分离株进行同源性比较,结果发现,本研究中的3株分离株与牛支原体同源性为99.7%～100%,12株分离株与牛鼻支原体同源性为98.8%～100%,从而在分子水平上分别鉴定为牛支原体和牛鼻支原体,未分离到牛眼支原体。本研究证实了新疆南疆地区牛场存在多种支原体的流行,相关部门应加强引种、运输检疫,养殖场应加强饲养管理,定期对牛群进行监测,以防影响当地畜牧业的健康发展。
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