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目的:以D-氨基半乳糖(G-GalN)联合脂多糖(LPS)腹腔注射制造肝衰竭模型为研究对象,分别予新石军方灌肠液干预(预防或治疗),观察造模十二小时后大鼠血清及组织学的变化,探讨新石军方治疗肝衰竭的疗效及部分作用机理,为中医药治疗肝衰竭提供科学理论依据。 方法: 1.雄性Wista大鼠,随机分为八组:空白对照组、模型对照组、石军灌肠液预防组(低、中、高剂量)、石军灌肠液治疗组(低、中、高剂量)。除空白对照组外,予D-氨基半乳糖(G-GalN)1000mg/Kg、脂多糖(LPS)100μg/Kg诱导大鼠肝衰竭模型。中药干预(预防或治疗),12h后取材。 2.观察造模后12h内大鼠病死率,分别于下腔静脉和腹主动脉无菌采血,检测肝功能(TB、Alt、Ast)、凝血酶原时间(PT)、血氨(NH3)、内毒素(LPS)。 3.取大鼠肝组织,光镜HE染色观察结构变化。 结果: 1.新石军方灌肠液能显著改善肝衰大鼠(D-GalN/LPS)行为异常,降低死亡率,尤以治疗中剂量组为佳(13-33%(2/15))。 2.①肝功能:与模型组相比,预防组和治疗组ALT、AST均显著下降(P<0.01);Tbil仅治疗各组与模型组比较具有差异性;AST中预防高组与预防中组比较有统计学显著差异(P<0.01);ALT、Tbil各预防组差异不明显。与治疗中剂量比较:ALT、AST中预防组(低)、预防组(中)、预防组(高)、治疗组(低)呈显著性差异(P<0.01);Tbil中预防组(低)、预防组(中)、预防组(高)、治疗组(高)呈显著性差异(P<0.01)。②PT:新石军方预防组(中)和治疗组(中)PT与模型组比显著减小(P<0.01)。预防中组与预防各组比较差异不显著。与治疗中剂量比较,预防组(低)、预防组(高)、治疗组(低)有差异性(P<0.05);治疗组(高)差异显著(P<0.01)。③血氨:和模型组相比,新石军方预防组(高)和治疗组(中)血氨减小有统计学意义(P<0.05)。预防中组与预防各组比较差异不显著。与治疗中剂量组比较,预防组(低)、预防组(高)差异显著(P<0.01)。④TNF:与模型组相比,治疗组(中)、治疗组(高)TNF具显著性差异(P<0.01)。预防中组与预防各组比较差异不显著。中药干预组与治疗中剂量组比较显示:治疗组(低)具有差异性(没搞懂你的意思)(P<0.05)。⑤内毒素:与模型组比较,预防组(中)、预防组(高)、治疗组(高)下降具有统计学意义(P<0.05);治疗组(中)降低具有显著性差异(P<0.01)。预防中组与预防各组比较差异不显著。治疗组(中)与中药干预各组差异不具统计学意义。⑥MicroRNA-122:与模型组比较,治疗组(中)、治疗组(高)具有显著性差异(P<0.01)。预防中组与预防各组比较差异不显著。预防组(低)、预防组(中)、预防组(高)、治疗组(低)与治疗组(中)比较MIR-122降低,具有显著性差异(P<0.01)。 3.光镜下,HE染色显示,正常对照组:肝小叶结构完整、排列整齐,呈嗜酸性,细胞核居中,肝细胞无变性、坏死,以中央静脉为中心呈放射状排列。模型组:肝组织坏死,小叶结构模糊不清,肝窦明显扩张、充血,汇管区可见较明显的炎症细胞浸润,残存肝细胞水肿变性。新石军方干预组:肝小叶结构不程度破坏,肝细胞有不同程度的点状坏死及炎性细胞浸涧,少部分呈气球样变,汇管区炎症细胞侵润。与模型组比较,肝细胞坏死程度改善,治疗组(中)肝细胞损伤最少。 结论: 1.新石军方可降低肝衰竭大鼠(D-GalN/LPS)死亡率,改善肝衰症状,尤以治疗中剂量组为佳。 2.新石军方对肝衰竭具有防治作用,治疗组疗效优于预防组,其中治疗中剂量组作用最为显著。 3.新石军方能显著提高肝组织中MicroRNA-122的含量,降低血清中内毒素、血氨、TNF、PT水平,提示新石军方能保肝利胆,减少肝细胞损伤,减轻肝脏炎症反应;凝血酶原时间缩短,改善凝血功能;酸化肠道,减少NH3吸收的功效。