论文部分内容阅读
目的组胺及吲哚美辛都有抗肿瘤的作用,将二者通过特殊的方法合成在一起,利用吲哚美辛的趋肿瘤作用,将组胺载到肿瘤病灶,发挥二者共同抗肿瘤的作用。本实验通过流式细胞仪、放免方法等,探讨吲哚美辛（IN）、组胺-吲哚美辛（HA-IN）对荷瘤小鼠Lewis肺癌生长的抑制及凋亡的效果,为临床提供重要的理论平台。材料与方法荷Lewis肺癌小鼠肿瘤接种后昆明小鼠的左腋下,待肿瘤长至1.0cm左右,将其分为5组,具体为3.0mg/kg吲哚美辛组、3.5mg/kg吲哚美辛组、3.0mg/kg组胺-吲哚美辛组、3.5mg/kg组胺-吲哚美辛组及生理盐水对照组治疗,均采用灌胃法,隔日给药,连续观察10天,治疗结束后通过每日对昆明小鼠肿瘤体积的观察,计算抑瘤率、绘制抑瘤曲线,来反映不同剂量组对肿瘤的抑制程度;通过ANNEXINV-FITC加PI双标法和PI单标法进行流式细胞仪分析:不同治疗组对肿瘤细胞凋亡率的测定及凋亡峰绘制,来反映不同治疗组对肿瘤细胞凋亡的作用;通过放免法测定肿瘤坏死因子（TNF-α）含量的测定,定量的分析不同治疗组对TNF-α的影响,通过TNF-α含量的高低间接地反映不同治疗组抗肿瘤的作用,最后,综合以上指标从多方面来评价不同治疗组,尤其是组胺-吲哚美辛抗肿瘤的最终的疗效。结果通过每日对不同剂量组的昆明小鼠肿瘤体积及质量的观察,并根据体积公式计算出抑瘤率,可见不同治疗组与对照组相比,存在显著性差异（P＜0.05）,其中高剂量组胺-吲哚美辛抑瘤效果最明显;采用ANNEXINV-FITC加PI双标法和PI单标法进行流式细胞仪检测发现:不同治疗组的凋亡率分别为3.0mg/kg组胺-吲哚美辛组24.7%;3.5mg/kg组胺-吲哚美辛组34.5%;3.0mg/kg吲哚美辛组21.2%;3.5mg/kg吲哚美辛组23.4%;通过PI单标记流式细胞仪检测发现:不同治疗组都在G0/G1峰前出现“亚二倍体峰”,并且组胺-吲哚美辛组出现要比IN组早,其中3.5mg/kg组胺-吲哚美辛组更明显;通过放免法测定TNF-α的含量得出:不同治疗荷瘤鼠组中的血清TNF-α的含量较治疗前均明显升高;不同剂量组中,高剂量组的TNF-α含量较低剂量组升高明显,可见TNF-α含量呈剂量依赖型,另外,不同剂量的组胺-吲哚美辛与不同剂量的吲哚美辛组间比较可见:3.5mg/kg组胺-吲哚美辛组与其他治疗组相比TNF-α含量有显著性差异（P＜0.05）,而3.0mg/kg组胺-吲哚美辛组与不同剂量的IN组相比TNF-α含量无显著性差异（P＞0.05）;结果显示不同剂量组抑瘤率、凋亡率、TNF-α含量与对照组均存在显著性差异,且高剂量的组胺-吲哚美辛无论是在抑制肿瘤上,还是肿瘤细胞凋亡及促进TNF-α的释放间接发挥抗肿瘤作用上,均较其他治疗组效果明显,可见组胺-吲哚美辛对未来临床肿瘤的治疗提供了一个崭新的方向。结论通过特殊方法将组胺与吲哚美辛合成在一起,并将其应用于抗肿瘤的实验研究中,再通过不同方法进行综合检测可见:组胺-吲哚美辛各组均可抑制肿瘤的增长及促进肿瘤细胞的凋亡,其中3.5mg/kg组胺-吲哚美辛组的作用更强,而且较单纯吲哚美辛的作用效果理想。因此,我们可有理由认为组胺-吲哚美辛作为药物在抗肿瘤方面有一定的疗效,为今后临床肿瘤的治疗提供了重要的理论基石。