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目的: 调节性B细胞(regulatory B cells，Bregs)是近年来发现的一类B细胞亚群，能分泌各种细胞因子，它们有利于自身免疫疾病中免疫耐受的维护，并且能抑制过量的炎症反应。本研究主要测定不同疾病活动度类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)病人外周血循环的两种调节性B细胞亚型，以及血清中相关细胞因子水平，通过分析它们与RA疾病活动度的相关性，来探索调节性B细胞在RA疾病中发挥的作用，进一步理解它们的生物学功能，也为RA疾病寻找可行的药物治疗靶点。 方法: 1.浙江省台州医院伦理委员会支持该项研究，所有病人均签知情同意书。根据1987年美国风湿病学院标准收集到59例不同疾病活动度的RA患者，同时收集到25例健康个体参与该研究。每个RA患者疾病活动度均根据28个关节疾病活动度得分来评价。并且，记录每个病人的临床实验室标志物，包括血沉(ESR)，类风湿因子(RF)，所有病人均排除肝，肾疾病和其它炎症或者自身免疫疾病。同时记录健康个体有关实验室指标。根据疾病活动度将病人分为三组，低活动度组(low activity，LA)，(DAS＜3.2)，中活动组(moderateactivity，MA)(3.2＜DAS＜5.1)，高活动度组(high activity，HA)(DAS＞5.1)。 2.所有参与者均采集5ml肝素抗凝静脉血。分离血清-80℃保存。全血细胞分类计数和ESR通过血常规分析仪(Alifax TEST I)检测，超敏C反应蛋白(hs-CRP)和RF用生化分析仪(IMMAGE800)测定。 3.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有参与者血清白介素10(IL-10)，白介素21(IL-21)，颗粒酶B(Granzyme B，GzmB)浓度。比较RA患者与正常对照之间的差异，并分析与RA患者Bregs细胞，及疾病活动度DAS28之间的关系。 4.利用流式细胞术检测所有参与者外周血中调节性B细胞CD19+CD5+CD1dhi和CD19+CD5+GzmB+细胞的比例，探讨分析二者与RA疾病活动度的关系。分析与分泌的相关细胞因子之间的关系。 5.实验数据采用SPSS统计软件进行分析（17.0版），数据用均值(mean)与标准误(standard error，SE)来描述，统计比较采用Mann-Whitney U-tests，两组之间相关性分析利用Spearman相关法，P＜0.05为差异具有统计学意义。 结果: 1.为了评价RA患者外周血细胞因子微环境，我们测定了RA患者和正常对照组血清IL-10，IL-21，GzmB水平。与正常对照相比较，RA患者血清中IL-10和IL-21的浓度是降低的，（IL-10:4.632±0.380 pg/mL vs.3.563±0.205pg/mL, P=0.0094; IL-21:398.5±25.28 pg/mL vs.320.9±14.61 pg/mL,P=0.0076)，然而GzmB水平与对照组相比没有不同（P=0.4772）。 2.RA患者细胞数量降低并且与RA疾病活动度负相关。我们观察到与健康对照组(healthy control，HC)(4.208±0.468％)相比，CD19+CD5+CD1dhi细胞的百分比在HA组(2.742±0.432％)和MA组(3.306±0.418％)是升高的， (PHA=0.0038，PHA=0.0409)。然而，三组RA没有差异（P＞0.05）。我们分析了CD19+CD5+CD1dhi细胞数量和RA患者临床特征指标间的相关性，CD19+CD5+CD1dhi细胞数量与DAS28显著负相关（r=-0.396，P=0.005），另外，CD19+CD5+CD1dhi细胞与血清IL-10，ESR，CRP，RF水平无统计学相关性（P＞0.05） 3.RA患者外周血中CD19+CD5+GzmB+细胞数量升高。我们检测了RA患者组和对照组CD19+CD5+B细胞亚群GzmB的表达，与CD19+CD5+CD1dhi细胞相反，我们观察到CD19+CD5+GzmB+细胞百分比升高，（LA:2.467±0.418％，P=0.0328;MA:2.200±0.232％,P=0.0352; HA:2.114±0.212％,P=0.0446; HC:1.632±0.191％)。但是，三组RA患者组没有显著差异（P＞0.05）。另外，RA患者中血清IL-21和GzmB浓度呈强正相关（r=0.4316，P=0.0048）。然而，CD19+CD5+GzmB+细胞和DAS28得分或血清IL-21水平无统计学相关（P＞0.05）。 结论: RA患者血清中IL-10，IL-21浓度较正常人，水平降低，并且，就我们的数据分析，二者之间存在微弱的正相关。但血清GzmB的浓度没有差异。IL-10具有抗炎作用，提示IL-10的降低可能导致机体免疫抑制功能受损，促进了RA的发展。IL-21有多种功能，包括促炎与抗炎作用，在RA中的作用还有待阐明。CD19+CD5+CD1dhi细胞是已被证实的能够分泌IL-10的Bregs。我们发现，CD19+CD5+CD1dhi细胞与RA疾病活动度负相关，因此，CD19+CD5+CD1dhi细胞抑制了RA疾病的发展过程，可以尝试通过促进CD19+CD5+CD1dhi细胞数量调节自身免疫反应。CD19+CD5+GzmB+细胞是新发现的能够分泌GzmB的Bregs，在RA患者中细胞数量是升高的，尤其在RA疾病活动度低的患者，随着疾病活动度的升高也逐渐下降，具体生物学功能还未知，就我们所得结果，进行了充分讨论。