哈蟆油水溶性大分子的提取分离及药效学研究

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哈蟆油(Oviductus Ranae,OR)为蛙科动物中国林蛙Rana,temoraria chensinensisDavid雌蛙的干燥输卵管。味甘、咸、平。具补肾益精、养阴润肺的作用。它是盛誉国内外常用的名贵滋补品和中药材,是我国的传统名贵中药之一。 哈蟆油中的化学成分比较复杂,对哈蟆油化学成分的研究,综观现有资料,主要是关于蛋白质类、脂肪酸类、激素样物质、磷脂类、微量元素等的研究。哈蟆油的主要成分是蛋白质,但却未见关于蛋白质单体化合物的研究。 现代药理研究表明哈蟆油总提取物具有镇咳祛痰、抗疲劳、抗衰老、抗脂质氧化、增强学习记忆功能等作用。但关于报道哈蟆油的蛋白质成分与药理作用的系统研究的报告甚少。 由于哈蟆油药用价值和经济价值都很高,市场上常有以伪品哈蟆油充当正品哈蟆油销售使用的情况。其外观性状较为相似,尤其是哈蟆油常以粉末形式人药,伪品哈蟆油更易与正品哈蟆油混淆,误用、混用现象时有发生。 作者利用离子交换层析、分子筛层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳等现代生物分离手段和方法,从哈蟆油中分离得到1个蛋白质单体化合物,经电喷雾质谱(ESI)、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及凝胶成像及分析系统分析测定其分子量为15.308kDa。 运用聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶成像分析系统相结合的技术,对不同来源哈蟆油及其伪品进行比较实验研究,结果此种方法鉴别中药材哈蟆油具有特征性强,取样量小,简便、快速、准确等特点且方法可靠、简单,重现性强,可供哈蟆油真伪鉴别参考。 药理实验表明哈蟆油总蛋白能增加正常小鼠及免疫抑制小鼠免疫器官重量,促进小鼠单核巨噬细胞吞噬功能,从而提高正常小鼠及免疫抑制小鼠的免疫力;能够增强小鼠抗疲劳作用;延长小鼠耐缺氧时间和增加小鼠的酚红排出量。
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