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嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila，Ah)是多种动物的重要病原菌，并可引起人的胃肠炎、败血症等疾病，对该菌的研究受到广泛关注。Ah可形成生物被膜(biofilm，BF)，被膜菌具有不同于浮游菌的各种特性。本试验研究了抗生素、温度等各种理化因素对BF的影响，对Ah BF的相关基因进行了PCR检测和序列分析，并比较了Ah疫苗口服及浸泡免疫的效果。 1 建立了Ah BF的体外形成模型，并对11种抗菌药物对BF细菌和浮游(free-cell，FC)细菌的清除作用进行了研究。发现作用于BF细菌与FC细菌的最小杀菌浓度(MBC)之比甚至在32:1以上。结果表明形成BF的Ah对抗菌药物可形成强耐受性，其潜在影响应引起足够重视。 2 用银染法及扫描电镜(SEM)观察检测AhJ-1、N-1、W-1及4332株产生BF的情况，同时检测温度和消毒剂对AhJ-1株的FC和BF细菌的影响，并通过PCR扩增被膜相关基因—转录调节蛋白基因(AhyR)。发现BF细菌经低温及0.01％新洁尔灭处理后尚有存活，而FC细菌几乎无存活细菌。致病性的Ah J-1、N-1株可形成BF，扩增出912bp的核苷酸片段，而非致病性的AhW-1、4332株不形成BF，无该基因。表明Ah的AhyR基因不仅与BF的形成有关，也与细菌的毒力有关。该菌株的AhyR基因与已发表的Ah AhyR基因的同源性达99％。 3 将热灭活的Ah BF菌苗和FC菌苗口服免疫小鼠和剑尾鱼。通过测定抗体效价、相对保护率、小鼠的淋巴细胞转化和肠道sIgA浓度，评价免疫效果。实验结果表明，BF菌苗较FC菌苗能更有效地刺激机体的免疫系统，尤其是肠道淋巴组织，对剑尾鱼和小鼠具有较好的保护力。 4 用Tn916诱变Ah J-1，筛选获得溶血素缺失突变株，其对小鼠的致病力降低，但喂服小鼠在第五周产生较高的抗体，对亲本强毒株J-1的攻击有保护作用。表明溶血素缺失突变株仍具有免疫原性。 5 制备Ah J-1株福尔马林灭活疫苗，用浸浴法免疫银鲫。设疫苗加IMS1312佐剂免疫组，不加佐剂疫苗免疫组及未免疫对照组。18-20℃水温饲养35d，检测银鲫血清嗜水气单胞菌凝集抗体及相对保护率。试验结果表明浸浴免疫对银鲫具较好的保护力，佐剂IMS1312可提高鱼体的免疫应答。