子宫内膜异位症影响妊娠的相关因素分析及动物模型的建立

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:TCH376854850
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1.目的  探索子宫内膜异位症(EMS)对不孕患者经体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗后妊娠结局的影响及妊娠相关因素的分析;并以小鼠为实验对象,通过手术造模,探索子宫内膜异位症小鼠模型成模状态最佳的时间,为以后相关研究提供参考,并为研究子宫内膜异位症对小鼠胚胎的影响做准备。  2.方法  2.1、临床研究:  选择自2012年1月至2016年6月在我中心行IVF-ET治疗的46例子宫内膜异位症合并不孕患者的55个取卵周期作为内异症组(EMS组);选择同期行IVF-ET治疗的126例非子宫内膜异位症患者的156个周期作为对照组(非EMS组),平衡两组患者的一般情况后,从CA-125水平、窦卵泡数(AFC)、促排卵药物启动量/总量、HCG日内膜厚度/类型、HCG日大卵泡数(直径≥14mm卵泡)、HCG日雌二醇(estrogen,E2)、HCG日每大卵泡数E2、获卵数、受精方式、MII数、正常受精数/卵裂数、优胚数、正常受精率、卵裂率、优胚率、胚胎着床率、生化妊娠率、临床妊娠率、早期流产率、活产率、周期取消率等方面进行回顾性分析,了解EMS对EMS相关性不孕患者的实验室及临床结局的影响;再将两组临床资料按临床结局分别分为妊娠组、未妊娠组,进一步明确EMS组和非EMS组中与妊娠结局相关的因素。  2.2、实验研究:  1)选择6周龄雌性无特殊病原体(specific pathogen free,SPF)级KM(昆明)小鼠33只,随机分为三组,每组11只。  2)适应新环境1周后,手术取出小鼠左侧子宫角,均分为4段,剪开子宫腔,得到四块子宫组织。其中两块组织以内膜面朝向腹壁的方向分别缝合在切口两侧腹壁上,一块组织剪碎后注入小鼠腹腔,剩余一块组织送病理检查,以确认所取组织来源于小鼠子宫;三组小鼠均采用此方法建立子宫内膜异位症模型。  3)于手术后2周、3周、4周分别处死三组小鼠,观察内异灶形态,并进行如下统计计算:①比较各组小鼠的术后存活率、不同部位病灶形成率、异位灶囊泡形成率及模型成功率;②组内比较腹壁、网膜、肠壁三个部位组织碎片的种植成功率;③组内比较缝合、碎片种植、缝合+碎片种植三种建模方式的成功率;④比较三组小鼠异位病灶的平均体积。  3.结果  3.1、临床研究:  EMS组 CA-125水平、周期取消率高于对照组(P<0.05);基础窦卵泡数(AFC)、HCG日大卵泡数、获卵数、MII数、2PN数、卵裂数、优胚数、优胚率低于对照组(P<0.05);HCG日大卵泡数与EMS患者妊娠失败的相关回归系数小于0(P<0.05)。  3.2、实验研究:  本实验采用 KM小鼠进行EMS的建模,参与本实验的33只小鼠中,术后存活28只。①三组小鼠术前未区分动情周期,但术后存活率、各部位病灶形成率、囊泡形成率及模型成功率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);②三组的组内腹壁、网膜、肠壁三个部位内膜碎片种植成功率的比较,差异均无统计学意义(P>0.05);③三组中组内缝合、碎片种植、缝合+碎片种植三种方式建模方式成功率的比较,其中仅术后4周组中碎片种植比缝合、缝合+碎片种植两种建模方式的成功率低,差异有统计学意义(P<0.05),后两者方式的建模成功率均为100%;④三组小鼠异位病灶平均体积比较结果显示,术后2周小鼠异位病灶体积小于术后4周小鼠异位病灶体积(4.00±2.85mm3 Vs.25.64±15.93mm3,P=0.001),差异有显著性统计学意义。  4.结论  4.1、临床研究:  子宫内膜异位症合并不孕患者卵巢储备功能下降,胚胎质量下降,更容易取消周期。但其卵子成熟率、正常受精率、卵裂率及临床结局与非内异症不孕患者相比无明显差别;HCG日大卵泡数是EMS患者妊娠的保护因素。  4.2、实验研究:  1)术后2周EMS模型已成功,且造模前无需统一动情周期;  2)子宫组织碎片在腹壁、大网膜、肠壁的种植率无差异;  3)术后2-3周行下一步研究的,可采用子宫组织碎片腹腔种植法建模;术后4周行下一步研究的,可采用子宫片段腹壁缝合法建模;  4)造模术后4周,异位灶平均体积最大,EMS模型效果最佳。
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