丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis的节律开关基因初探

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ivyJZ2009
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生物的近日节律是指生物的大部分生命活动和行为以大约24小时为周期进行有规律地重复。在黑腹果蝇、小鼠以及人类等模式动物中,近日节律机制已得到了较为深入的研究。在果蝇中,节律基因cry1通过感光来调节中枢生物钟的通路使之与光照同步。与果蝇等多数昆虫不同的是,膜翅目昆虫的生物钟系统在缺少了cry1及timeless等重要组分时仍维持了完整的生物钟计时功能。究竟是怎样的机制或组分弥补了这些功能,特别是对光开关基因cry1的功能进行的补偿,这一问题值得讨论。  本研究选取寄生于家蝇(Musca domestica)中的常见膜翅目昆虫丽蝇蛹集金小蜂(Nasonia vitripennis)作为研究对象,通过对将其长期置于黑暗状态后施加迅速光刺激时的RNA表达情况与未施加时进行对比,尝试发现可能行使功能补偿的基因。我们选择per(period)、cry2(cryptochrome2)和tim2(timeout)作为目标基因,rp1和gapdh作为对照基因;取相同数量的四批小蜂各自在0:00、3:00、12:00、15:00四个时间点进行1小时光刺激,并分别在间隔一天之后从0:00起每隔三小时取样,共九次。进行总RNA提取、RNA反转录以及RT-qPCR实验,对RNA表达情况进行相对定量。  结果发现cry2基因发生了比较活跃地表达,这可能预示着它对果蝇中cry1的光开关功能进行了替代。此外,这一结果仍需要原位杂交实验和基因敲除实验的验证。
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