【摘 要】
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Era蛋白的N端是一个典型的鸟苷酸结合蛋白结构域,与其它G蛋白有较高的同源性;C端含有一个RNA结合功能结构域—KH结构域.研究这种从细菌到人类高度保守的新G蛋白家族成员对于
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Era蛋白的N端是一个典型的鸟苷酸结合蛋白结构域,与其它G蛋白有较高的同源性;C端含有一个RNA结合功能结构域—KH结构域.研究这种从细菌到人类高度保守的新G蛋白家族成员对于探索自然并发现规律具有重要意义.作者的研究工作可以分为两个部分.1、利用酵母双杂交钓取人Era蛋白的结合蛋白.2、利用RNAi技术封闭人和鼠era基因在相应细胞中的表达,观察细胞发生的变化. 首先我们以hEra蛋白作为诱饵蛋白,从人era基因表达较高的胎肝cDNA文库中,筛选得到了15个候选作用蛋白.结果表明,hEra蛋白在GTP存在情况下可以和NTR/C345C domain结合.hEra蛋白和NTR/C345C domain相互作用的初步结果为我们进一步研究提供了方向和线索.另外我们还利用自行构建的专门用于RNAi的shRNA表达载体,在相应细胞内降低了人和鼠era基因的表达.细胞生长曲线结果表明,人和鼠era基因的表达下调,可以引起"S"形生长曲线右移;透射电镜结果也显示,人和鼠era基因的表达下调后,绝大部分细胞都出现在分裂前状态.
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