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对羟基苯甲酸是土壤中的主要化感物质之一。本研究以对羟基苯甲酸为唯一碳源的培养液,从含对羟基苯甲酸较高的竹林土壤中筛选、分离和纯化了一株高效降解对羟基苯甲酸菌;测定了它在不同环境条件下的生长情况,分析了其对羟基苯甲酸的降解能力以及对其它几种酚类化感物质的降解特性,为进一步研究微生物修复对羟基苯甲酸污染的土壤提供了参考依据。
从竹林土壤中分离和纯化的菌株,在牛肉膏蛋白胨固体培养基上培养24h,其菌落为乳白色,圆形,隆起,不透明,表面光滑,湿润,边缘整齐;液体培养菌液浑浊且有少量沉淀。菌体形态为圆形或椭圆形,革兰氏染色阴性,无运动性,无鞭毛。
生理生化特性检测结果表明,菌株的硝酸盐还原试验阳性,尿素分解试验阳性,淀粉水解试验阴性,在37℃条件下能生长,不能发酵半乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、海藻糖、蜜二糖、乳糖、纤维二糖、松三糖、棉籽糖和甘露糖,可以利用葡萄糖、果糖、蔗糖、半乳糖、甘露醇和乙醇作为碳源,不能分解棉籽糖、乳糖、木糖、阿拉伯糖、纤维二糖、山梨糖、肌醇和麦芽糖。结合18S rDNA序列分析的结果,初步鉴定该菌株为粘红酵母菌(Rhodotorula glutinis)。
菌株在20~40℃生长良好,最适生长温度为30℃;pH4.0~6.0范围不能生长,pH7.0范围生长情况良好,最适生长pH为7.0;连续光照和连续黑暗培养条件下对菌的生长无显著差异;采用深层琼脂法观察氧气对菌的生长影响,结果表明,菌只能在琼脂深层培养基表面生长,属于需氧型菌,适宜摇床培养。
用HPLC方法检测了菌株对不同浓度的对羟基苯甲酸的降解能力,结果表明,菌株在72h能将0.5g/L对羟基苯甲酸彻底降解,对1g/L对羟基苯甲酸有较强的降解能力。菌株还能有效地降解阿魏酸、对香豆酸和对羟基苯甲醛酚类化感物质。在处理1g/L对香豆酸48h可以降解65%,对0.5g/L阿魏酸和对羟基苯甲醛48h降解达90%以上。