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HIV（human immunodeficiency virus）进入靶细胞需要经过侵入、逆转录、基因整合、表达包装蛋白和释放病毒颗粒等步骤。基于HIV的整个生命周期,药物分为进入抑制剂、逆转录抑制剂、整合酶抑制剂和蛋白酶抑制剂。整合酶抑制剂能够抑制整合酶,进而阻断病毒DNA与靶细胞核DNA的整合;且整合酶为外来酶,抑制剂不会作用于宿主细胞本身,故安全性良好;在鸡尾酒疗法中,整合酶抑制剂不与其他类型配伍药物相互产生不利作用。目前世界上治疗艾滋病的主要方法是药物控制。天然药物结构多样,来源丰富,具有很大的潜力。通过查阅文献和本实验室做过的研究,发现天然药物A可能具有良好的抗HIV的作用。而且用表面等离子共振的Biacore SPR分析,中药A与整合酶有较好的结合作用,故本文试图以天然药物A为基础,找到其中能与整合酶结合的有效部位或有效分子。本文完成的工作如下:第一,整合酶的纯化和表达。通过质粒转化,接种细菌诱导表达,获取了纯度很高的带有Histrip标签分子量为35 KD的可溶性整合酶蛋白;第二,中药A粗提液的提取与活性测试。用60%的乙醇浸取中药A,获得中药A的粗提液。用Biacore SPR技术检测,选取RU值大于100的药物,本文获得的生药浓度500μg/mL时RU变化值为144,确定有效。用CCK8和MAGI法体外实验获得粗提液细胞毒性TC50为547μg/m L,最大无毒计量为250.7μg/mL,对病毒的抑制效果IC50为101.77μg/mL;第三,有效部位的富集和活性测试。用整合酶对粗提液进行富集,得到了有效部位,其SPR检测的RU变化值为447,有效部位收集液稀释125倍时病毒抑制率为92.2%,125倍稀释程度作为最大无毒计量。半数抑制浓度为稀释3125倍后的浓度,显示出了极好的效果;第四,用HPLC-MS法和计算机分子模拟对接法分析分子的化学空间结构和结合机制,确认其中有效分子为P和Q,且这对同分异构体对整合酶的计算机模拟对接打分值为104和94,而阳性对照雷特格韦的打分值为112,说明获得的有效分子具有良好的抑制整合酶功能的效果。总之,通过上述工作,获取了中药A中的有效抑制整合酶的同分异构体分子P和Q,并阐明了与整合酶的结合机制,为下一步的中药A活性成分分析打下良好的基础。