论文部分内容阅读
HIV-1由于存在非常大的基因多样性，有着能够逃避宿主免疫的多种机制。现在主要是采用抗逆转录病毒方法(Highly Active Anti-retroviral Therapy,HAART)，来治疗HIV-1感染者。但HAART疗法较为昂贵，且有很多副作用，在发展中国家并没有得到很好的推广应用。所以针对HIV-1的疫苗开发，还是很有意义的。中和抗体反应，与临床上许多疫苗的有效性非常相关，在HIV-1疫苗开发时也是优先考虑的方面。但现有阶段，在HIV-1疫苗设计领域并没有取得很多进展，所设计的疫苗并不能很好地诱导能中和单一亚型内的不同HIV-1突变株的抗体，亚型间更难产生。 在自然的感染过程的前几个月，HIV-1在病人体内主要是诱导产生没有中和能力的抗体，或者是株型特异性的抗体。而在感染后几年，约有20％的HIV-1感染者体内会出现广谱中和抗体(Broadly Neutralizing Antibody,BNAb)。在2009年以前，已分离出2F5和4E10等一代广谱中和抗体。随着高通量筛选技术的出现及改进，二代广谱中和抗体陆续被发现并分离出来，其中和能力能达到一代中和抗体的十几倍。 本课题选取中国2009年到2012年较新的HIV-1毒株样本，成功构建筛选出20个HIV-1Env克隆，包括11个01_AE亚型克隆，3个B亚型克隆，6个07/08_BC亚型克隆。连同HIV-1的病毒骨架共转293T细胞，包装假病毒，测定病毒的感染滴度TCID50，进行中和测定并测定病毒的感染嗜性，并对克隆进行了一定程度的序列分析。发现HIV-1对于中和反应的敏感性，可能与亚型有关。已构建的克隆在序列上，有着非常大的差异性，一定程度上能代表中国现阶段的主要流行亚型，适合用于评估针对中国区的HIV-1开发的疫苗，对中国区的HIV-1疫苗开发有一定的帮助。