【摘 要】
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本文对深黄被孢霉Δ-脂肪酸脱氢酶基因缺失突变株构建进行了探讨。本研究利用亚硝基胍(MNNG)诱变方法筛选了一株深黄被孢霉潮霉素B敏感型菌株M6-22-4。采用PEG介导的方法，将含
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本文对深黄被孢霉Δ<6>-脂肪酸脱氢酶基因缺失突变株构建进行了探讨。本研究利用亚硝基胍(MNNG)诱变方法筛选了一株深黄被孢霉潮霉素B敏感型菌株M6-22-4。采用PEG介导的方法，将含有E.coli潮霉素B抗性标记的PD4质粒转入敏感株M6-22-4原生质体，并在潮霉素B浓度为400 μg/mL的选择培养基上筛选转化子，获得了1.6-2.8个转化子/μg质粒DNA的转化频率。稳定性试验表明，质粒线性化后所获得的转化子在PDA培养基上传代10代以后，转接到选择平板上有31.6％仍具有HmB抗性；从中随机挑选了3个转化子，通过PCR方法检测到潮霉素抗性基因的存在，Soythern杂交表明，潮霉素抗性基因以1-2个拷贝整合到深黄被孢霉M6-22-4染色体上。
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