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为探索应激对肉鸡胆汁酸代谢通路的具体影响,及其对脂肪代谢和AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)通路的影响及联系,本课题进行了以下研究。本研究通过糖皮质激素处理离体肝细胞,探索胆汁酸代谢通路和脂肪代谢相关基因的变化情况。用200nmol/L、500nmol/L、1000nmol/L的糖皮质激素磷酸钠和Williams’E培养基分别处理原代培养的肝细胞。试验结果显示,糖皮质激素处理的肝细胞LXR(肝脏X受体)、NTCP(钠离子牛磺胆盐共转运体)、FATP-1(脂肪酸转运蛋白1)、SREBP-1C(固醇调节元件结合蛋白1)、APOB100(载脂蛋白B)的mRNA表达量显著降低(P<0.05),BSEP(胆盐输出泵)的mRNA表达量显著升高(P<0.05)。说明糖皮质激素处理降低了肝细胞中的脂肪代谢,增加了胆汁酸的分泌。本研究通过热应激、糖皮质激素和能量水平处理,研究不同应激源对胆汁酸代谢通路和脂肪代谢的影响。热应激试验:选取28日龄体重相近的肉鸡48只,随机分为四个处理组,分别为72小时热应激处理组(31±1℃)、72小时对照组(25±1℃)、24小时热应激处理组(31±1℃)和24小时对照组(25±1℃)。糖皮质激素试验:选取28日龄体重相近的肉鸡48只,随机分为四个处理组,分别为72小时糖皮质激素处理组(DEX,2.0mg/kg体重)、72小时对照组(生理盐水,2.0mg/kg体重)、24小时糖皮质激素处理组(DEX,2.0mg/kg体重)和24小时对照组(生理盐水,2.0mg/kg体重)。不同能量水平试验:选取1日龄体重相近的雄性AA肉仔鸡216只,随机分为3个组:低能量组,高能量组,对照组。每个处理组有6个重复,每个重复有12只鸡,低能量组饲粮能量水平为2900kcal/kg,高能量组饲粮能量水平为3500 kcal/kg,对照组饲粮能量水平为3200kcal/kg。试验结果显示,热应激显著增加了FATP-1、SREBP-1C、APOB100mRNA表达量(P<0.05),糖皮质激素显著降低了FXR(类法尼醇X受体)、LXR、CYP7A1(胆固醇7-羟化酶)、FATP-1、SREBP-1C、APOB100的mRNA表达量(P<0.05),高能日粮显著增加了SREBP-1C的mRNA表达量(P<0.05)。说明,热应激和高能日粮都促进了脂肪代谢,糖皮质激素则降低了脂肪代谢和胆汁酸的合成。本研究通过在日粮中添加胆汁酸,研究体外添加胆汁酸对胆汁酸代谢通路和脂肪代谢的影响。选取1日龄体重相近的雄性AA肉仔鸡200只,随机分为5个组:其中4个试验组日粮中添加胆汁酸的剂量分别为100g/t、200g/t、300g/t、400g/t,1个对照组。每个处理组有4个重复,每个重复有10只鸡。试验结果显示,添加400g/t的胆汁酸能显著提高肉鸡的生产性能,血液中LDL(低密度脂蛋白)含量显著降低(P<0.05),肝脏中FXR的mRNA表达量显著降低(P<0.05),SREBP-1C、BSEP和NTCP的mRNA表达量显著升高(P<0.05)。说明,日粮添加胆汁酸降低了体内胆汁酸的合成,增加了胆汁酸的肝肠循环。本研究通过不同能量水平的日粮饲喂应激的肉仔鸡,研究不同能量水平对应激影响的胆汁酸代谢通路是否有缓解作用。选取1日龄体重相近的雄性AA肉仔鸡432只,随机分为6个组:低能量应激对照组,高能量应激对照组,标准能量应激对照组,低能量应激组,高能量应激组,标准能量应激组。每个处理组有6个重复,每个重复有12只鸡。研究结果发现,改变日粮的能量水平加强了应激对肉鸡脂肪代谢的影响。本研究表明,热应激和高能日粮增加了肉鸡肝脏中的脂肪代谢。而糖皮质激素则降低了肉鸡肝脏中胆汁酸的合成,同时减少脂肪的代谢。日粮中添加胆汁酸提高了肉鸡的生产性能,减少了胆汁酸的合成,促进了胆汁酸的分泌。肉鸡应激时,糖皮质激素能减少脂肪的代谢,改变日粮的能量水平会增强应激对肉鸡的影响。