塔里木马鹿茸其因鉴定及其冻干粉生物学活性研究

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塔里木马鹿(Cervus elaphusyarkandensis)是中国马鹿种群的一个优秀亚种,因为世代在塔里木盆地繁衍生息而得名。塔里木马鹿茸有产量大而且质量好的特点,被国际市场誉为“亚洲之花”。我国新疆的塔里木马鹿在农二师驯养以来,有很大的存栏量,作为一个品质比较优秀的鹿茸,塔里木马鹿茸值得进行大力开发。长久以来,我国的研究者在谈论我国鹿茸产业的发展时也都认为树立自己的鹿茸品牌至关重要。要树立塔里木马鹿茸品牌,首先要对塔里木马鹿茸进行身份认证,有专属的标签是首要工作之一。随着分子生物学技术的发展,mtDNA作为遗传标记之一已被广泛应用。mtDNA其中的12SrRNA片段是一个研究热点,被应用于动物的系统学分类、动物药的鉴定以及鹿类的研究中。本实验选取12srRNA序列,通过对塔里木马鹿茸和其他马鹿茸的这段序列进行对比,设计出了一对特异性引物,通过该因物对进行PCR反应可以特异性鉴定出塔里木马鹿茸;另外在差异序列中发现了限制性内切酶PshB I的酶切位点,该内切酶可以通过酶切反应特异性鉴定出塔里木马鹿茸,从而成功地建立了快速、准确的塔里木马鹿茸基因鉴定方法。   我国药典认可的鹿茸是鹿科动物梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角,传统医药认为鹿茸有壮肾阳、益精血、强筋骨、调冲任、托疮毒的功效.现代药理学研究发现,鹿茸有性激素作用、调节机体免疫功能、促进创面愈合、对骨骼和骨细胞影响作用,另外在抗衰老抗氧化、抗肿瘤、以及心血管系统、神经系统方面也有显著的作用。由于鹿茸良好的疗效,多国科研人员致力于鹿茸的现代药理学研究,为鹿茸的现代临床应用做出指导。随着现代药理学的不断发展,发现鹿茸这个特性和它本身是一个天然的细胞生长因子库有极大的关系,在其生长过程中,成骨细胞、神经细胞、成纤维细胞及上皮细胞的生长同步进行,鹿茸作为鹿体最活跃的生长点贮存大量的生长因子,包括:胰岛素样生长因子(IGF)、表皮生长因子(EGF)、神经生长因子(NGF)、转化生长因子(TGF)等。在鹿茸顶部非骨化部位存在有大量的IGF-1早已被证实。IGF-1可以用于预防和减少骨质疏松的发生,临床治疗骨质疏松,与鹿茸传统的强筋骨功效,治疗筋骨萎软、骨折、骨质疏松的临床应用相符合,提示鹿茸在这方面的作用,有可能是与其含有的IGF-1有关。鹿茸中的EGF被认为是鹿茸迅速增殖的因素之一,它作用于表皮,促进其生长以包裹新增长的骨质。EGF对外胚层和内胚层来源的一些组织有促进分裂和刺激合成代谢的作用,所以能加速创伤和烧伤的愈合。EGF的作用与鹿茸传统应用中促进长期不易愈合的溃疡创口再生的功效,创伤病人口服和外用鹿茸后外伤迅速愈合的效果一致,提示鹿茸在这方面的作用,有可能是与其含有的EGF有关。鹿茸传统加工为热炸茸,该工艺流程多要经过高温,对鹿茸中一些不耐高温的活性成分如生长因子造成了损害。很多已有研究表明,要最大的发挥出鹿茸对骨骼、创面愈合方面的疗效,选取生长因子活性保留最好的冷冻干燥工艺加工的鹿茸会是明智之举。因此,本实验选用金鹿集团的塔里木马鹿茸冻干粉为实验材料,重点研究了该塔里木马鹿茸冻干粉样品的IGF-1活性和EGF活性。在对各自的敏感细胞株增殖实验中,冻干粉水提物对MCF-7有显著增殖作用,表现出IGF-1活性,进一步了阐明鹿茸冻干粉的药理作用,可以指导其临床应用;另一方面,冻干粉水提物在Swiss3T3细胞实验中没有表现出阳性增殖作用,这部分需要再进一步的研究。
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