扶正祛毒方干预慢性HBV携带小鼠的实验探讨

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目的:慢性HBV携带者临床上常表现为:HBV DNA高水平复制,血清ALT和AST在正常范围,肝组织学检查通常无病变或病变轻微。患者传染性较强,可隐匿进展为肝硬化或HCC。慢性HBV携带者处于免疫耐受期,现代医学尚无针对此类患者的理想治疗手段。我国是HBV感染大国,慢性HBV携带者人数众多,疾病负担较重,解决此问题尤为重要。前期研究发现扶正祛毒方对慢性HBV携带者有抑制HBV复制的作用,并能上调IFN-γ的表达。基于以上研究,本课题组设计了以下实验,用扶正祛毒方干预HBV转基因小鼠,检测ALT、AST、HBV DNA、IFN-γ、IL-10的表达,计算脾脏指数,并观察肝组织病理,探讨扶正祛毒方对HBV复制及肝组织病理的影响,并研究其对HBV转基因小鼠免疫功能的调节作用。方法:将30只HBV转基因小鼠随机分为中药治疗组、西药治疗组和模型对照组,10只同品系正常小鼠作为空白对照组。中药治疗组予扶正祛毒方药液灌胃,西药治疗组予阿德福韦酯药液灌胃,模型对照组及空白对照组予生理盐水灌胃,各组均连续给药12周后取材。用全自动生化分析仪检测血清ALT、AST水平,qPCR技术检测HBV DNA表达,计算脾脏指数,Elisa检测肝组织中的IFN-γ、IL-10水平,HE染色观察肝组织病理。结果:①ALT、AST血清均值水平:模型对照组的ALT均值水平高于其余3组,差异均有统计学意义(P<0.05);中药治疗组、西药对照组与空白对照组的ALT均值水平均无明显差异(P>0.05)。4组的AST均值水平无明显差异(P>0.05)。②HBV DNA相对基因表达:西药治疗组和中药治疗组的HBV DNA表达无明显差异(P<0.05)。③脾脏指数均值水平:空白对照组脾脏指数均值水平明显高于模型对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05);模型对照组、中药治疗组和西药治疗组脾脏指数均值水平的差异均无统计学意义(P>0.05),但中、西药治疗组小鼠的脾脏指数均值水平均较模型对照组高。④IFN-γ均值水平:西药治疗组的IFN-γ均值水平明显高于其余3组,差异均具有统计学意义(P<0.05);模型对照组与空白对照组IFN-γ均值水平的差异无统计学意义(P>0.05);中药治疗组与模型对照组IFN-γ均值水平的差异无统计学意义(P>0.05)。⑤IL-10均值水平:空白对照组的IL-10均值水平明显低于其余3组,差异均具有统计学意义(P<0.05);模型对照组IL-10的均值水平低于西药治疗组,差异均具有统计学意义(P<0.05);中药治疗组与模型对照组IL-10均值水平的差异无统计学意义(P>0.05)。⑥肝组织病理:模型对照组小鼠肝细胞排列欠规整;部分肝细胞出现毛玻璃样变或空泡样变性;但肝组织内未见明显淋巴细胞浸润,汇管区无明显纤维增生。其余3组小鼠肝细胞排列规整,无明显病理性改变。结论:①扶正祛毒方可改善慢性HBV携带小鼠肝组织损伤,或许可以改善慢性HBV携带者的预后。②扶正祛毒方在短期内对慢性HBV携带小鼠免疫指标(IFN-γ、IL-10等)的表达无明显影响。③扶正祛毒方对慢性HBV携带小鼠或许有抑制HBV复制的作用。
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