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棉铃虫是鳞翅目夜蛾科昆虫，因摄食杂，食量大，繁殖力强，严重危害我国农业经济。用化学药物控制害虫，害虫会逐渐产生抗药性，给防治带来更大的困难，同时化学药物也给人类健康带来不利。通过体内、体外研究方法，深入掌握害虫发育规律及机理，从生物学角度设计扰乱害虫生长或借用天然病原体控制害虫的生物防治具有针对性强，特异性高，对人类及环境无污染等优点，具有广阔的发展前景。 本论文在实验室前期工作基础上，进行了两种棉铃虫功能基因重组病毒杀虫剂的实验研究，为筛选新的重组病毒候选基因提供实验证据。论文还探索建立了三种体外连续传代的棉铃虫细胞系，为进一步在体外研究棉铃虫活体细胞的激素调控、病毒感染、细胞凋亡等分子生物学机制奠定了基础。现将论文内容概括如下： 第一部分：棉铃虫功能基因重组病毒杀虫剂研究 杆状病毒中绝大部分是昆虫特异性病原，因不感染脊椎动物，是理想的控制害虫的生物“工具”。然而根据研究得知，野生型杆状病毒具有杀虫谱窄，杀虫速度慢的缺点。遗传改造病毒，选用外源基因构建重组病毒，使重组病毒感染虫体后除了病毒的毒杀作用外还通过外源基因的持续表达双重干扰昆虫，以加快害虫的死亡、提高害虫的死亡率，大大减少农林业的经济损失。已报道了多种基因重组病毒，如蝎毒素、螨毒素、利尿激素、保幼激素酯酶等基因的重组病毒，其杀虫效果虽都优于相应的野生型病毒，但仍不理想。新的安全高效的基因重组病毒候选基因需要探索和发现。 棉铃虫激素接受子3(Helicoverpa hormone receptor 3，HHR3)是蜕皮激素直接诱导的棉铃虫蜕皮调节转录因子激素接受子3，是棉铃虫蜕皮级联反应过程的关键调控因子，HCB(Helicoverpa armigera cathepsin B-like proteinase)是参与棉铃虫胚胎发育及成虫脂肪体降解的半胱氨酸蛋白酶。实验室前期工作已将两个基因分别定点插入双启动子表达载体pFastBacDUAL(即p10启动子和多角体蛋白基因启动子，其中p10启动子下游已插入了绿色荧光蛋白基因)的多角体蛋白基因启动子下游，本论文在紧接侯选基因后面再插入来自AcMNPV的多角体基因，转座获得阳性重组菌株后，分别