花生和大豆根腐病的病原鉴定及其生物学特性研究

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花生(Arachis hypogaea)和大豆(Glycine max)都是我国重要的农作物。本文以广东省博罗县等地出现的花生和大豆根腐病2种病害为研究对象,分别开展了病原菌的分离鉴定、病原菌的生物学特性以及病害的田间发生调查等研究工作。结果如下:   1.花生和大豆根腐病的病原鉴定   花生根腐病主要危害花生茎基部、果针、荚果和根系,罹病部位变黑腐烂,高湿条件下常形成大量红橙色子囊壳;幼苗和成株均可发病。通过病原的分离、致病性测定、病原菌的形态特征和β-微管蛋白基因片段序列的分析,将花生根腐病确诊为花生黑腐病(Cylindrocladium black rot,CBR),其病原菌鉴定为寄生帚梗柱孢菌Cylindrocladium parasiticum Crous,Wingfield & Alfenas,有性阶段为冬青丽赤壳菌Calonectria ilicicola Boedijn & Reitsma。该病原菌的分生孢子梗生于末端为圆球形泡囊的菌柄上,帚状分枝;分生孢子圆柱形,1~(3)个隔膜,大小为(36.9)-59.5-(73.8)×(4.9)-6.4.(7.4)μm;该菌为同宗配合,子囊壳红橙色,亚球形至卵形;子囊棍棒状,具长柄:子囊孢子无色,拟纺缍形至镰月形,1-3个隔膜。花生黑腐病是我国进境植物检疫性植物病害,本文是该病在我国的首次发现和报道。   大豆根腐病危害大豆茎基部及根部,病株茎基部变红并伴有大量红橙色球状子囊壳聚生,造成大豆提前落叶;发病后期植株整个根系变黑腐烂,最终植株死亡。以致病性和形态鉴定为基础,辅以分子生物学技术,将大豆根腐病确诊为大豆红冠腐病(Soybean red crown rot,RCR),其病原鉴定为寄生帚梗柱孢菌C parasiticum。基于β-tubulin基因片段序列的系统发育分析表明花生黑腐病菌的菌株和大豆红冠腐病菌的菌株同源性很高,结果进一步证明:花生黑腐病菌和大豆红冠腐病菌为同一真菌,即寄生帚梗柱孢菌。大豆红冠腐病为华南地区的首次报道。   2.寄生帚梗柱孢菌的生物学特性   研究包括培养基种类、温度、光照、pH、碳氮源等对2个寄生帚梗柱孢菌株生长和繁殖的影响,以及病原菌对多种杀菌剂的敏感性测定。寄生帚梗柱孢菌在不同的培养基上形态各异;燕麦培养基最适合该菌的生长和产孢,V8培养基最适宜微菌核和子囊壳的形成;28℃是病原菌的最佳生长和繁殖温度;光暗交替最有利于寄生帚梗柱孢菌产孢;菌丝在pH 4.0-10.0的范围内均能生长,以6.0-7.0菌丝产量最高;单糖最有利于寄生帚梗柱孢菌的生长和产孢;不同寄生帚梗柱孢菌株利用氮源的能力不同。   采用菌丝生长速率法测定了2个寄生帚梗柱孢菌菌株对18种杀菌剂的敏感性。结果表明:寄生帚梗柱孢菌对氟环唑最为敏感,该杀菌剂的EC50值为1.8606μmL-1;其次为戊唑醇和咪鲜胺,它们的EC50值分别为2.6807μgmL-1和2.7992 μg mL-1。   4.病害的田间发生分布与危害调查   迄今的调查发现:花生黑腐病在我省9个市县均有分布危害;在与广东省接壤的江西省和福建省也有发生分布。苗期和成株期均是花生黑腐病的感病时期。   大豆红冠腐病在我省多市有发生分布。该病害从花荚期开始发病,鼓粒期为盛发期。与健康植株相比,罹病植株干重、有效荚数、有效粒个数与粒重呈显著减少,分别降低44.59%、48.52%、52.48%、63.38%,豆粒中的磷含量亦明显下降33.33%。
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