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新霉素属氨基糖苷类抗生素药物，对革兰氏阴性菌有极好的抑制作用，广泛应用于医药和兽药领域。随着新霉素在国内外畜牧养殖业中越来越广泛地应用，它在动物体内产生残留的问题也日益严重。为探索一种快速而有效的监测动物组织中新霉素残留的方法，本实验将新霉素分别与牛血清蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联合成免疫原和包被原，制备了针对新霉素的多克隆抗体和单克隆抗体，并利用新霉素多克隆抗体建立了鸡组织中新霉素残留检测的ELISA方法。
免疫新西兰大白兔，经六次免疫后采血获得抗新霉素多克隆抗体，并建立了新霉素的ELISA检测方法，结果显示抗体效价可达1:5×10<5>，包被原最佳工作浓度为1:3×10<3>，抗体的工作浓度为1:1×10<5>，酶标二抗(羊抗兔IgG-HRP)最佳稀释浓度为1:3000。标准曲线线性检测范围为0.11～5.28 ng/mL，IC<,50>为0.3ng/mL；与链霉素、庆大霉素、卡那霉素、安普霉素、妥布霉素以及阿米卡星等氨基糖苷类化合物进行交叉反应性试验，交叉反应率均小于0.1％；并对鸡肌肉，肝脏，肾脏进行添加同收试验。在50、100、250ng/g添加浓度水平下，在鸡肌肉、肝脏和肾脏中测得的平均添加回收率范围分别为71.86％～93.30％、71.88％～97.80％和74.6％～94.20％；变异系数为6.90％～10.00％。
免疫BABL/C小鼠，经五次免疫后，建立间接ELISA方法并测定抗血清效价，结果表明：抗体血清效价为1:1×10<4>。用杂交瘤技术建立了一株能稳定分泌抗新霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为686。体内诱生腹水法制备单抗，收集腹水并进行单抗特性的鉴定。间接ELISA方法测定包被原的最适包被稀释度为1:5×10<3>，单抗最适稀释度为1:8×10<4>，酶标二抗(羊抗鼠IgG-HRP)最佳稀释浓度为1:3000。采用间接竞争ELISA方法建立检测新霉素的标准曲线，曲线在0.48～23.59 ng/mL之间呈良好线性，相关系数R<2>=0.9914，IC<,50>为2.69 ng/mL。该单抗与其它六种氨基糖苷类抗生素均未发现交叉反应性。该细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。