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背景和目的在人类生命之中,睡眠是必不可少的,约占人们生命的三分之一。睡眠是生物机体的本能行为之一,对于维持种族延续和个体生存具有重要的意义。另外,睡眠也是一种生命中非常独特的运动形式,是机体在生命活动中所进行的一种自我调节以及自我保护的过程,对于机体的正常生理和心理方面的维护都有非常关键的作用。睡眠剥夺表示因为环境或个体原因导致睡眠的质量下降或者睡眠数量减少的一种状态。研究发现,睡眠剥夺不仅可以引起机体行为、情绪、学习、记忆等方面的变化,还能引起激素分泌、神经递质释放、即刻早期基因表达及一些特异蛋白表达的变化。在现代社会的发展过程中,人类的生活节律也在不断加快,同时生活中会遇到了很多应激事件,甚至会因此产生一系列的睡眠障碍或者产生睡眠剥夺的状况,从而影响机体各系统生理功能,造成生理节律的紊乱。在睡眠剥夺对心理生理活动产生的各种效应中,心脏功能和大脑功能受到的影响是最严重的,所以目前关于睡眠剥夺方面的研究国内外多集中在这两个角度来进行的。然而在更加深入研究的过程中,很多的实验及研究也证明了睡眠剥夺会对于身体各方面的功能产生比较严重的影响。颞下颌关节紊乱病是多发和常见的口腔颌面部疾病之一,累及颞下颌关节及其周边口颌系统肌肉群,它有着非常复杂的发病机理及致病因素。在研究过程中发现,一些不良的情绪状态和负面的心理因素(抑郁、焦虑等)在颞下颌关节紊乱病的产生发展过程中会产生较大的影响。而睡眠剥夺就是其中的一种非常重要的内源性应激源,是否会导致颞下颌关节的一些病症,或者加重这方面的疾病,进而影响口颌系统的运动功能,国内外尚未见报道,因此,睡眠障碍对口颌系统运动功能的影响及相关机制亟需深入研究。本课题通过睡眠剥夺对咬肌损伤效应进行相关研究,为进一步阐明睡眠剥夺与颞下颌关节紊乱病的关系奠定理论基础。材料和方法1.睡眠剥夺动物模型的建立及评价将50只大鼠进行随机分组,使之分成正常对照、大平台对照、睡眠剥夺1天组、5天组、9天组,共五组,并采用改良后的多平台方法建立相应的模型体系；观察睡眠剥夺各时间段大鼠行为学变化；观察睡眠剥夺后血清促肾上腺皮质激素(CORT)、皮质醇(ACTH)、促甲状腺激素(TSH)含量的变化。2.睡眠剥夺对大鼠咀嚼肌肌电图影响的研究将50只大鼠进行随机分组,使之分成正常笼养对照组、大平台对照组、睡眠剥夺1天组、5天组、9天组,共五组,并采用改良后的多平台方法建立相应的模型体系；观察睡眠剥夺各时间段大鼠咀嚼肌肌电图的变化。3.睡眠剥夺对大鼠咬肌组织形态学及超微结构影响的研究将50只大鼠进行随机分组,使之分成正常对照、大平台对照、睡眠剥夺1天组、5天组、9天组,共五组,并利用改良多平台睡眠剥夺法建立大鼠睡眠剥夺模型；观察睡眠剥夺各时间段大鼠咬肌组织形态学的变化；观察睡眠剥夺各时间段大鼠咬肌超微结构的变化。4.睡眠剥夺对大鼠咬肌氧化应激指标及炎症指标影响的研究将50只大鼠进行随机分组,使之分成正常对照、大平台对照、睡眠剥夺1天组、5天组、9天组,共五组,并建立相应的模型,进一步观察睡眠剥夺对咬肌内的有关氧化应激的指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢(H202)含量的影响；观察睡眠剥夺对咬肌组织中炎症指标高敏C反应蛋白(hs-CRP)含量的影响。结果1.睡眠剥夺动物模型的建立及评价(1)利用改良之后的多平台方法建立相应的大鼠睡眠剥夺模型体系,具有良好的睡眠剥夺模拟效果。(2)大鼠基本情况：睡眠剥夺1天时,提高了大鼠的兴奋性以及活动性；5天时,大鼠有明显的攻击现象甚至出现攻击行为；9d时,出现了活动能力降低以及反应力减弱,精神萎靡、呼吸加快、呈现出一种非常虚弱的状态,精神极差。其他对照组大鼠行为及饮食正常,与实验前进行对比体质及身体质量明显增强增加,对于外界的刺激反应也准确灵敏。(3)旷场试验：在垂直活动得分以及水平活动得分中NC组和TC组差异无统计学意义,睡眠剥夺1天以及睡眠剥夺5天组垂直活动得分和水平活动得分均高于正常对照组和大平台对照组,而睡眠剥夺9天组两方面得分均低于正常对照组和大平台对照组,且均有统计学差异。(4)血清学指标：与正常对照组和大平台对照组相比,随着睡眠剥夺时间的延长大鼠血清中促肾上腺皮质激素(CORT)、皮质醇(ACTH)、促甲状腺激素(TSH)的含量均呈现先增高后降低的趋势。2.睡眠剥夺对大鼠咀嚼肌肌电图影响的研究睡眠剥夺1d、5d和9天组在松弛状态颞肌、咬肌的电位略高于对照组,差异具有统计学意义。紧咬状态时颞肌、咬肌的肌电位均明显高于正常对照组和大平台对照组,具有显著统计学意义。另外,睡眠剥夺各组肌电静息期较对照组显著延长。3.睡眠剥夺对大鼠咬肌组织形态学及超微结构影响的研究(1)咬肌组织形态学：睡眠剥夺可以对咬肌产生不同程度的影响,主要组织学表现为肌纤维排列紊乱、粗细不均,肌横纹模糊消失,肌纤维萎缩断裂,炎细胞浸润,肌组织内部血管增生、扩张等,这种变化在短期内随睡眠剥夺时间的延长而加重。(2)咬肌超微结构：睡眠剥夺5天组大鼠咬肌肌细胞线粒体出现水肿,细胞基质密度降低,线粒体嵴减少,肌纤维微血管内出现轻微充血性改变；睡眠剥夺9天组大鼠咬肌线粒体出现严重空泡性变,肌纤维微血管出现更为严重的充血性改变。4.睡眠剥夺对大鼠咬肌氧化应激指标及炎症指标影响的研究(1)氧化应激指标：与正常对照组和大平台对照组相比,睡眠剥夺后大鼠咬肌组织中GSH及H202的含量明显升高(P<0.05),且随着睡眠剥夺时间的延长有明显上升的趋势；而SOD、GSH-PX及CAT的活性随睡眠剥夺时间的延长有降低的趋势。(2)炎症指标：咬肌组织中hs-CRP含量随睡眠剥夺时间的延长呈持续增高趋势。结论1.对于多平台睡眠剥夺法进行合理改良,能够得到较好的大鼠睡眠剥夺模型。2.睡眠剥夺会导致大鼠行为学和大鼠血清学指标发生改变,行为学及血清学指标是评价睡眠剥夺动物模型建立成功与否的标准。3.睡眠剥夺可对大鼠咀嚼肌肌电图造成影响,这可能是颞下颌关节紊乱病的病因之一。4.睡眠剥夺可引起大鼠咬肌产生明显的组织形态学方面的变化,而且会导致肌纤维微血管出现充血性改变及线粒体受损,这种变化随时间的延长而加重。5.睡眠剥夺可引起大鼠咬肌发生明显的氧化应激反应,并可引起大鼠咬肌发生明显的炎症反应。