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沙门氏菌的各种血清型可对人、畜、禽和野生动物引起疾病，沙门氏菌引发的疾病遍布世界各地，许多血清型的沙门氏菌可使人感染并发生食物中毒。近年来，禽沙门氏菌病的发生日趋严重，鸡白痢是其中的一种，而且此病在流行、发生、临床表现及剖检变化、药物敏感性等许多方面都发生了一些新的特点，目前在鸡白痢病方面还没有一种有效的疫苗防治。本研究对收集的禽源沙门氏菌进行鉴定，耐药性和毒力基因的分析，并筛选了其中两株鸡白痢沙门氏菌，运用病理组织学和免疫组织化学方法进行致病性研究。 1、禽源沙门氏菌的鉴定及血清型分析 本试验对收集的10株背景清晰的禽源沙门氏菌，进行培养，革兰氏染色、PCR鉴定、血清型测序分析及生化实验，并以肠炎沙门氏菌参考标准株作为对照。结果表明鸡源沙门氏菌中有2株为鸡白痢沙门氏菌，1株为猪霍乱沙门氏菌;鸭源沙门氏菌中有1株为肠炎沙门氏菌，6株为鼠伤寒沙门氏菌。 2、禽源沙门氏菌的耐药基因检测及耐药性分析 通过K-B(Kirby-Bauer)法对收集的10株沙门氏菌进行14种药物敏感试验及11种对应的耐药基因PCR检测，并以大肠杆菌ATCC25922作为对照。检测结果表明对链霉素的耐药率最高，达到了70％;对氨苄西林的耐药率为30％;对阿莫西林，诺氟沙星，四环素，复方新诺明的耐药率均为20％;对头孢西林，卡那霉素，庆大霉素，氯霉素的耐药率均为10％;对头孢哌酮，新霉素，氧氟沙星，诺氟沙星均表现出敏感性，有四株菌表现为多重耐药;耐药基因检测结果表明耐药基因catA1在的检出率为100％;aadA1，aadA2，sulⅠ的检出率在50％以上，qnrB，tetB，blaTEM，tetA，sulⅡ的检出率低于35％;blaPSE，qnrA，tetG检出率为0。分析沙门氏菌耐药性的结果与耐药基因的结果表明，药物的耐药表型与耐药基因的检出率基本一致，细菌所携带的耐药基因与其对药物耐药性呈正相关，沙门氏菌DNA上携带的耐药基因能很大程度的决定其耐药性。 3、禽源沙门氏菌的毒力基因检测 采用PCR技术检测了10株沙门氏菌15个毒力基因，它们已知参与沙门氏菌的粘附，侵袭和存活。检测结果表明大多数沙门氏菌对选择的大多数毒力基因都是阳性的，携带率均在80％以上，其中1号菌株携带检测的全部毒力基因;pipD，fimA，misL，sopA，invA，stn，spvC，spiC，sifA和orf319的检出率均为100％;virK的携带率为90％;sipA的携带率为80％;spvB的携带率为60％;fliC的携带率为40％。 4、鸡白痢沙门氏菌的致病性研究 根据10株菌的感染宿主的临床症状，毒力基因检测，筛选两株鸡白痢进行动物致死性感染试验，筛选出致病性较强的一株测定半数致死量试验，以此为依据进行动物感染试验，同期根据药敏试验结果选用临床兽用药进行抗生素治疗试验。经腹腔注射，分别在感染第1d、3d、5d、7d、10d、15d取SPF鸡的心、肝、脾、肺、盲肠、法氏囊进行HE染色，选取肝脏和盲肠测定载菌量;选取损伤最为严重的肝进行毒力蛋白SpiC的定位及相关肝损伤指标的免疫组织化学染色。 在感染第3d到第7d是死亡高峰期，也是各器官损伤最严重的时期。同期肝脏Spic的表达范围最广，表达量最高，与肝脏坏死灶的分布一致，说明毒力蛋白与肝损伤有关。Caspase-1和Caspase-3也在此期间高表达，说明了在此期间肝脏受到损伤，即细菌感染导致动物的器官损伤，因此使宿主发病。