论文部分内容阅读
目的研究PLGC模型大鼠肠道菌群失衡特征以及探讨复方蜥蜴散凝胶对失衡菌群的调节,治疗PLGC疾病作用机制。方法将120只SD雄性大鼠随机分成空白对照组20只,模型对照组100只。模型组采用MNNG复合造模法造模。造模成功后,随机分为复方蜥蜴散凝胶不同浓度0.07 g/ml(低剂量)、0.14 g/ml(中剂量)、0.28g/ml(高剂量)治疗组,维酶素治疗对照组,模型组对照组,空白对照组。除空白组,其他各组连续干预12周。分批无菌采集造模成功后治疗前(治疗0周)、治疗早期(治疗第4周)、治疗后期(治疗12周)各组大鼠粪便。对胃黏膜组织进行HE检查病理分析,对粪便样本进行16Sr RNA基因测序分析?结果1.治疗后大鼠生理、病理表现复方蜥蜴散凝胶各治疗组在药物干预后,大鼠各生理、病理状况都明显好转如肠胀气等症状消失。与模型组比较,复方蜥蜴散凝胶各治疗组部分大鼠黏膜萎缩得到修复,肠上皮化生得到改善,异型增生见消退,其中以复方蜥蜴散凝胶中剂量组(MD组)效果更显著。2.MNNG复合法诱导PLGC模型组大鼠与空白组大鼠肠道菌群的差异性分析(1)alpha多样性变化:模型组与空白组相比,Simpson指数(P=0.0284018370442)显示两组菌落多样性存在明显差异,且模型组较空白组菌落丰富度明显降低。(2)Beta多样性分析:Firmicutes是BC和MG中最丰富的门(86.37%±4.14%vs.68.44%±23.89%),其次是Bacteroidetes(11.57%±3.99%vs.21.57±16.88%),在门水平,空白组中的Firmicutes明显高于模型组,而Bacteroidetes低于模型组。在属水平上,Lactobacillus在BC和MG中最为丰富(33.59%±14.78%vs.17.55%±11.24%),空白组Lactobacillus明显高于模型组,而Bacteroides则低于模型组。在门级,Firmicutes富集BC,Proteobacteria富集MG。在属和种的水平上,Lactobacillus,Christensenella和Ruminococcus bromii在BC中富集,而Bilophila,Phascolarctobacterium,Prevotella和Ruminococcus flavefaciens在MG中富集。3.复方蜥蜴散凝胶对PLGC大鼠肠道菌群的差异性影响结果治疗后发现7个菌属发生了明显变化,分别是Akkermansia、Bacteroides、Coprococcus、Lactobacillus、Prevotella、Ruminococcus、Turicibacter。各治疗组中,VC12W(P=0.0465)组Akkermansia含量减少;LD12W(P=0.0214)中Bacteroides含量增加;Coprococcus在LD4W(P=0.003)和LD12W(P=0.0002)减少,而在HD4W(P=0.0002)和HD12W(P=0.0082)增加;Lactobacillus在LD4W(P=0.0029)中减少,而在VC4W(P=0.0007),MD4W(P<0.0001)和MD12W(P<0.0001)中增加;Prevotella在MD4W(P=0.0144)和MD12W(P<0.0001)减少,而在VC12W(P=0.0029),HD4W(P<0.0001)和HD12W(P<0.0001)增加;Ruminococcus在VC4W(P=0.029),VC12W(P=0.0005),LD12W(P=0.0005),MD12W(P=0.0014)和HD12W(P=0.0063)中减少。Turicibacter在HD4W(P<0.0001)和HD12W(P<0.0001)减少,而在LD12W(P=0.0041)中增加。结论1.复方蜥蜴散凝胶可以整体改善胃癌前病变模型大鼠综合生理状态,如进食进水量、精神状态及存活情况,及改善模型大鼠病理状态,如萎缩、肠上皮化生及异型增生胃黏膜腺体情况。2.PLGC模型大鼠肠道中菌群存在失调,主要由正常消耗型菌群(Firmicutes)转变为变异性较大的菌群(Proteobacteria)。3.复方蜥蜴散凝胶可通过对肠道菌群的双向调节作用如增殖有益菌,抑制有害菌,平衡肠道菌群结构,治疗PLGC疾病。4.本方可能通过扶正健脾起到对益生菌的扶植作用,可以促进肠道益生菌(Akkermansia、Lactobacillus、Bacteroides)的生长,其机制可能是补益类中药多含多糖类成分,具有益生元(Prebiotics)的作用;通过解毒排毒、通降行气促进胃肠道蠕动,减少有害菌(Prevotella、Coprococcus、Ruminococcus、Turicibacter)菌群在肠道的停留时间,抑制致病菌生长。