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紫锥菊(Echinacea purpurea(L.)Moench.)为多年生草本植物,原产于北美和加拿大。是目前欧美普遍用于治疗感冒、咳嗽、上呼吸道感染等疾病以及提高人体免疫力的一种草药。紫锥菊的应用产生了巨大的经济效益,已经成为美国和欧洲最受欢迎的治疗药物之一。菊苣酸是紫锥菊的特征成分,在采后贮藏加工的质量控制中以菊苣酸的含量为标准,对其进行分析可以为生产提供指导性依据。
本文简要综述了紫锥菊的应用价值、药理学研究、质量控制以及采后贮藏加工技术方面的研究进展。采用两种传统中药炮制方法以及微波加热方法对紫锥菊进行了加工,利用薄层色谱图象分析法对不同处理材料和不同贮藏时间的紫锥菊菊苣酸含量进行了测定。并结合酶活性测定、显微镜组织化学、电镜技术等方法对影响多酚含量变化的原因进行研究。主要研究结果及结论如下:
1.利用不同处理时间和不同处理温度的水煮、蒸汽加热方法以及不同功率和时间的微波加热方法处理紫锥菊,用薄层色谱测定菊苣酸含量后发现:100℃水煮烫杀10 min、100℃蒸汽烫杀15 min和640 W微波加热150 s分别是三种方法中菊苣酸含量保存最高的处理条件。通过对三种方法和常规方法(常温晾干)进行比较,发现菊苣酸含量最高的处理方法是:640 W微波加热150 s,效果依次为:常温晾干<水煮烫杀<蒸汽烫杀<微波加热。
2.用薄层色谱和图像分析法对不同贮藏时间的材料进行质量评价,发现经过高温加热处理的药材菊苣酸在三个月内的降解速度均比常温晾干的材料慢,可有效保存紫锥菊药材。其中以微波处理的效果最好,但考虑到设备条件等问题,建议采用蒸汽加工的方法。
3.对多酚含量变化的影响因素多酚氧化酶(PPO)进行酶活性测定和同工酶电泳分析,探讨PPO与菊苣酸含量的关系。结果表明,处理温度越高酶活性越低,在60℃和70℃酶仍有部分活性,继续高温可使多酚氧化酶进一步失活。在底物含量一定的情况下,按照酶的活性越低,其氧化底物的能力越低,剩余的底物含量越高的理论,温度处理过的紫锥菊PPO活性是随着温度上升而降低的,菊苣酸含量应该也随着温度上升而逐渐增加。薄层色谱分析结果却末如此,在常温到100℃的水煮和蒸汽加热过程中,菊苣酸含量出现特殊的“U”型变化趋势,60℃和70℃为最低点。
4.通过电子显微镜技术对处理过的紫锥菊根和根茎部位的组织细胞的观察,发现从60℃开始细胞的膜系统发生透性加大现象,细胞物质外泻。结合薄层色谱、PPO活性分析和组织细胞超微结构观察三方面的实验结果分析,在60℃和70℃菊苣酸含量急剧下降,是由于细胞膜透性增大,使具有一定活性的PPO与多酚接触发生氧化降解;80℃以上尽管细胞膜遭破坏的程度加大,由于高温对酶活性的钝化作用加大,具有较弱活性的酶与底物接触发生氧化反应的程度较低,对多酚含量影响不大,使菊苣酸含量上升。常温和50℃条件下PPO活性最大,但不与多酚接触,使得菊苣酸含量保持在较大值。
5.利用AlCl3荧光显微法,对经过不同温度水煮和蒸汽处理的紫锥菊根和根茎部位的组织细胞进行观察,用以验证薄层色谱的方法,以及直观体现组织细胞中多酚含量的变化情况。在常温到100℃的梯度温度变化中,荧光强度变化随温度变化呈“强——弱——强”,与薄层色谱测定的多酚含量“U”型变化的结果吻合。