青蒿素和姜黄素联用对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖、凋亡以及端粒酶活性的影响

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目的:研究不同浓度和不同作用时间青蒿素、姜黄素及两药联合运用对人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖、细胞凋亡及端粒酶活性的影响。方法:通过体外培养人肝癌细胞株HepG2细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度青蒿素、姜黄素单独作用及两药联合运用对人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖的抑制作用的影响;通过倒置显微镜观察药物作用后细胞的形态;采用流式细胞仪检测药物对肝癌细胞周期及细胞调亡的影响;采用TRAP-PCR银染法检测药物对肝癌细胞端粒酶的活性的影响。结果:单药应用青蒿素和姜黄素均对HepG2细胞增殖有抑制作用且随药物浓度和作用时间的增加而增强,具有时效性和量效性。浓度为80μmol/1青蒿素、浓度为40μmol/L的姜黄素单独作用于细胞24h、48h、72h后,与阴性对照组相比,HepG2细胞的抑制率分别为26.24%、39.05%、37.14%和33.39%、47.21%、46.75%。两药合用后,HepG2细胞的抑制率为40.11%、49.51%、57.31%,其抑制率与单独用药组及阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),两药联合运用具有效能叠加作用。倒置显微镜下见细胞贴壁能力下降,细胞形态缩小,密度下降,死细胞漂浮于培养液上。流式细胞术结果显示的80μmol/l浓度青蒿素和40μmol/l姜黄素和两药联合运用作用48H后,HepG2细胞细胞周期均表现为G0/G1期细胞比例上升,细胞周期被阻滞于G0/Gl期;与阴性对照组相比,其调亡率增高,联合用药与单独用药组相比,其调亡效果更加显著(p<0.05);TRAP-PCR银染法(端粒酶重复序列扩增法)检测端粒酶的活性显示,姜黄素与联合用药组能降低端粒酶的活性,而青蒿素对肝癌细胞端粒酶活性未见明显影响。结论:青蒿素、姜黄素单独应用或联合运用均能有效抑制人肝癌细胞株HepG2细胞的增殖,阻滞细胞周期,加快凋亡,且联合用药具有效能增强的作用,并且姜黄素能抑制肝癌细胞端粒酶活性。其抑癌作用可能通过阻滞细胞周期和抑制端粒酶的活性有关。
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