【摘 要】
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以往实验证明NMDA在应激引起海马神经元损伤过程中起重要作用,CNTF在减弱其损伤过程中有快速作用,但此作用机理尚未明了。本课题以NMDA诱发海马神经元损伤为细胞损伤模型,用J
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以往实验证明NMDA在应激引起海马神经元损伤过程中起重要作用,CNTF在减弱其损伤过程中有快速作用,但此作用机理尚未明了。本课题以NMDA诱发海马神经元损伤为细胞损伤模型,用JAK/STATs阻断剂PTPi-2阻断CNTF已知的经典信号转导通路,观察CNTF非经典信号转导途径的快速神经保护功能,并探讨其可能机制。主要实验结果: 1.MTT比色结果表明不管JAK/STATs通路阻断与否,CNTF都会对NMDA损伤的海马神经元起保护作用。 2.活细胞内游离Ca2+结果显示,NMDA可引起细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)迅速升高;CNTF可显著抑制NMDA引起的海马神经元[Ca2+]i升高;先以PTPi-2阻断CNTF的JAK/STATs通路,CNTF对NMDA引起的[Ca2+]i升高的抑制效应仍然存在。并且,CNTF能够有效抑制Tg阻断肌浆网Ca2+-ATP酶后引起的细胞内钙离子浓度升高作用。 3.全细胞膜片钳记录结果显示NMDA可诱发一大的内向电流,CNTF可快速抑制NMDA诱发的电流,用PTPi-2阻断CNTF的JAK/STATs通路后仍可快速抑制NMDA诱发的电流。 综上所述,通过研究NMDAR在CNTF非经典信号转导途径中的作用,证明CNTF可通过非经典的信号转导通路发挥快速保护海马神经元的作用,该通路位于经典信号转导通路JAK/STATs的上游,与胞内钙离子有关,NMDAR在该途径中是一个重要的单元。
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