【摘 要】
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目的：免疫球蛋白表面有丰富的糖基化修饰，这些糖基化修饰不仅仅影响蛋白折叠及构象稳定，也在免疫识别信息传递方面发挥着重要作用。系统性红斑狼疮（SLE）是一种自身免疫性疾病，患者
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目的：免疫球蛋白表面有丰富的糖基化修饰，这些糖基化修饰不仅仅影响蛋白折叠及构象稳定，也在免疫识别信息传递方面发挥着重要作用。系统性红斑狼疮（SLE）是一种自身免疫性疾病，患者血清中含有大量的针对自身成分的抗体，但SLE血清中免疫球蛋白的N-聚糖表达水平仍不明。本课题着重利用ESI-LTQ质谱仪研究SLE血清中免疫球蛋白的N-聚糖结构以及糖基化表达水平。 方法：⑴纯化SLE患者血清样本及正常人血清样本中的总的免疫球蛋白及IgG；⑵用PNGase F酶酶切处理纯化后的样本，通过C18 SEP预装柱去除杂质；⑶还原处理N-聚糖的还原末端；⑷在碱性环境下使用碘甲烷将 N-聚糖进行甲基化反应，获得甲基衍生化的 N-聚糖；⑸使用质谱仪检测并鉴定从血清样本中纯化出的甲基化后的N糖结构；⑹采用统计学软件对SLE及正常人血清免疫球蛋白表达的N-聚糖情况进行糖组学分析。 结果：①通过质谱仪鉴定分析，我们在SLE血清总免疫球蛋白中鉴定了43种N-聚糖；对43种N糖进行糖组学统计分析后发现在SLE患者的总免疫球蛋白N糖基化存在半乳糖及唾液酸缺失现象，相对于正常人其高甘露糖型的N糖修饰表达量上升，且与SLE临床诊断指标抗ds-DNA抗体含量表达存在相同趋势。②在SLE血清IgG水平上鉴定了27种 N-聚糖，并对27种N糖链进行糖组学分析发现,IgG表面的糖基化也存在半乳糖及唾液酸缺失。 结论：在总免疫球蛋白及单纯的IgG抗体水平相对于正常人都检测到 N糖基化发生异常,主要体现在半乳糖及唾液酸水平的N糖表达含量下降。结合文献资料，N糖修饰主要表达在抗体的Fc端，故我们认为免疫球蛋白中半乳糖的缺失以及唾液酸水平的下降使得 N乙酰葡糖胺暴露，影响了抗体的空间构象使得抗体更容易与下游的促炎症激活受体以及甘露糖受体结合并激活炎症细胞分泌更多炎症因子引发炎症反应。
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