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目的宫颈癌是危及妇女健康的第二大恶性肿瘤,化疗是宫颈癌综合治疗的一种重要手段。吉西他滨（gemcitabine,GEM）是近年来用于宫颈癌治疗的新型化疗药物,核糖核苷酸还原酶亚单位M1（ribonucleotide reductase subunit M1,RRM1）是GEM在细胞内作用的靶点。本研究通过探讨宫颈癌细胞系RRM1表达水平与细胞对GEM敏感性的关系,并寻求逆转耐药的方法,以期为指导临床宫颈癌GEM个体化化疗提供理论依据。方法采用MTT法检测3种宫颈癌细胞系C33a、Hela、CaSki对GEM、DDP及GEM+DDP的敏感性,RT-PCR、Western Blot检测各细胞系的RRM1表达水平;对Hela进行GEM诱导耐药培养,检测耐药细胞的耐药指数及RRM1表达水平的变化;对CaSki进行RRM1-siRNA转染,检测转染前后细胞RRM1表达水平及对GEM的敏感性的变化;收集相同浓度DDP不同作用时间及不同浓度DDP相同作用时间下的两组CaSki细胞,检测DDP作用后细胞RRM1蛋白表达水平的变化,流式细胞仪检测DDP、GEM单独及联合用药下细胞周期的变化及细胞凋亡情况。结果3种宫颈癌细胞系C33a、Hela、CaSki在GEM作用下72小时的IC50分别为0.58μM、1.43μM、14.39μM,在DDP作用下72小时的IC50分别为3.91μM、3.09μM、3.82μM。C33a RRM1表达水平相对最低,CaSki相对最高,Hela居中。DDP与GEM联合作用于CaSki有药物协同作用。GEM诱导耐药培养获得的Hela耐药细胞的耐药指数为3.6,其RRM1 mRNA及蛋白表达水平均上升。RRM1-siRNA瞬时转染CaSki细胞48小时后检测细胞RRM1表达水平下降,随着RRM1-siRNA浓度的增加,RNA干扰效应增强,同时CaSki对GEM的敏感性增加。随着DDP作用浓度的增加及作用时间的延长出现CaSki RRM1表达的增强。GEM单用或DDP与GEM联合作用下均出现细胞S期阻滞,没有显著差异（P=0.205）,但联合用药时细胞凋亡增加（P=0.035）。结论宫颈癌细胞系对GEM的反应存在着异质性,宫颈癌细胞系RRM1表达水平与细胞对GEM的敏感性呈负相关。通过GEM的诱导耐药,细胞在获得耐药的同时RRM1表达增高。细胞RRM1表达增高与GEM继发耐药有关。RRM1-siRNA干扰可下调细胞RRM1表达,逆转细胞GEM耐药。DDP与GEM在体外实验存在药物协同作用,作用机制与RRM1表达无直接关联,可能与促进细胞凋亡增加有关。