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目的：缺血预适应具有强大的抗心肌缺血以及再灌注损伤的保护作用，但是将缺血作为一种治疗手段不是令人满意的一种方式。研究发现激活许多的受体能够模拟缺血预适应的保护作用，我们以往的研究发现激活M3受体能够产生早期预适应样的保护作用，但是激活心脏M3受体能否诱导晚期预适应以及其潜在的分子机制如何，尚不明了。因此本实验拟探讨M3受体能否诱导晚期预适应的保护作用并阐明其潜在的机制。
方法:1、本实验采用western blot技术在成年Wistar大鼠和原代培养乳鼠心室肌细胞水平验证心脏M3受体的存在、检测缺血预适应中心脏M3受体含量的变化、胆碱诱导的晚期预适应效应物Hsp70、COX-2、iNOS等的表达水平以及缺血和药物处理过程中缝隙连接蛋白Connexin43(Cx43)的磷酸化水平。2、采用结扎左冠状动脉前降之的方法，建立缺血预适应以及心肌缺血和缺血再灌注损伤模型根据Curtis＆Walker评分系统对大鼠冠状动脉结扎30分钟内的室性心律失常进行评分，并且应用triphenyltetrazolium chloride(TTC)染色法检测大鼠心肌缺血再灌后的梗死面积的大小。3、利用BL-420E多道生理记录仪检测缺血30min后血流动力学功能的变化。
结果：(1)乳鼠心室肌细胞以及正常成年大鼠心室细胞膜存在M3受体高丰度的表达。(2)缺血预适应（缺血/再灌三个循环之后）24h后大鼠左室心肌细胞膜蛋白M3受体表达显著升高。(3)胆碱激活M3受体在24h后能够能降低缺血导致的心律失常的发生率和严重程度，这一保护作用被给予M3受体阻断剂4-DAMP取消，而M2受体阻断剂Methoctramine对此没有影响(4)胆碱激活M3受体能够在24h后缩小缺血再灌注导致的心肌梗死面积产生心肌保护作用。这一保护作用被给予4-DAMP阻断而不被M2受体阻断剂Methoctramine逆转(5)在正常成年Wistar大鼠心肌细胞缝隙连接蛋白Connexin43主要以磷酸化形式存在；心肌缺血时Cx43发生去磷酸化，去磷酸化形式显著增多导致磷酸化形式减少，胆碱激活M3受体能够恢复Cx43的磷酸化状态。然而给予4-DAMP能够取消M3受体的保护作用，而Methoctramine则没有影响。(6)胆碱激活M3受体能够上调Hsp70和COX-2的表达，而对iNOS的表达没有什么影响，同样M3受体激活剂胆碱的这一作用能够为4-DAMP所阻断而Methoctramine对此没有影响。
结论：(1)免疫印迹技术检测到无论成年大鼠还是原代培养乳鼠心室肌细胞均存在相应的蛋白条带，表明不论成年大鼠还是乳鼠心室肌细胞均存在高峰度的M3受体。(2)数个循环的心肌缺血再灌注可使24h后成年大鼠心室肌细胞M3受体表达明显升高，这些表明M3受体可能参与晚期预适应的心肌保护作用。(3)胆碱激活M3受体能够减少缺血导致的心律失常的发生率和严重程度，并能够减少缺血再灌导致的心肌梗死面积的大小，表明胆碱激活M3受体能够诱导晚期缺血预适应样的保护作用。(4)胆碱激活M3受体通过减少缺血过程中发生的Cx43的去磷酸化增加Cx43的磷酸化形式，能够维持缝隙连接的开放状态保持心肌细胞电活动的偶联从而抗缺血性心律失常。(5)激活M3受体能够上调晚期缺血预适应的效应物Hsp70和COX-2的表达从而减少缺血再灌注导致的心肌梗死面积大小。