塞来昔布对急性白血病原代细胞增殖及血管新生的影响

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目的研究环氧化物酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对急性白血病原代细胞增殖的影响,初步探讨COX-2抑制剂塞来昔布的抗肿瘤作用,为COX-2抑制剂塞来昔布应用于急性白血病的防治提供可靠的实验依据。方法收集2010年2月至2011年7月河南科技大学第一附属医院血液科初诊未治的急性白血病患者16例,Ficoll密度梯度离心法取患者骨髓单个核细胞分离,接种于含体积分数为10%灭活的胎牛血清的RPMI1640培养基中常规培养。用不同浓度(0~100μmol/L)塞来昔布处理细胞,采用MTT法检测塞来昔布对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用,并用倒置显微镜观察细胞形态学改变,采用均数比较及多因素分析等统计学方法探讨塞来昔布对急性白血病原代细胞增殖的影响。结果1.塞来昔布对急性白血病原代细胞的生长抑制率从3.48%增加到53.24%,且呈时间和剂量依赖关系(P<0.05),即随着药物作用和时间的延长,细胞生长的抑制率逐渐升高。2.未经处理的急性白血病细胞呈圆形或椭圆形,大小均一,生长旺盛,悬浮成团呈“葡萄样”生长。而经80μmoL/L的塞来昔布与以上细胞共育48h后,可观察到塞来昔布对细胞有明显的毒性作用,细胞体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞中颗粒增多,细胞碎片明显增多。结论塞来昔布对急性白血病原代细胞的生长增殖有明显的抑制作用,且能使急性白血病原代细胞的形态学发生变化,导致细胞变性坏死,最终使白血病细胞死亡。因此,塞来昔布有可能成为治疗白血病的一种新药,但具体的机制有待进一步的研究。目的为了进一步探讨塞来昔布对急性白血病原代细胞增殖受到抑制的原因,并探讨血管新生网络调控系统在急性白血病发生发展中的作用。方法收集2010年2月至2011年7月河南科技大学第一附属医院血液科初诊未治的急性白血病患者16例,Ficoll密度梯度离心法取患者骨髓单个核细胞分离,接种于含体积分数为10%灭活的胎牛血清的RPMI1640培养基中常规培养。取对数生长期细胞,分为两组,对照组使塞来昔布最终浓度为0μmol/L,实验组则为80μmol/L,培养48小时后,采用免疫组化法检测急性白血病原代细胞血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子-β(TGF-β)的表达情况。计量资料的均数比较采用t检验、方差分析、直线相关分析等统计学方法探讨塞来昔布对急性白血病血管新生调控网络的影响。结果1.对照组(0μmoL/L的塞来昔布)VEGF、bFGF、TGF-β的阳性表达率分别为46.69±7.12、27.19±8.19、79.19±16.23,积分分别为102.63±12.97、56.81±14.91、161.56±36.20,实验组(80μmoL/L的塞来昔布)VEGF、bFGF、TGF-β的阳性表达率分别为36.19±5.99、16.38±5.07、81.05±15.76,积分分别为73.38±11.02、36.31±9.62、165.44±33.77。VEGF、bFGF实验组均明显高于对照组,P<0.01,差异有统计学意义。TGF-β实验组与对照组比较均无统计学意义,P>0.05。2.为了探求急性白血病原代细胞VEGF、bFGF、TGF-β之间的表达是否有相关性,进行直线相关分析结果显示VEGF表达与bFGF、TGF-β均呈正相关(r分别为0.534、0.408,P值均<0.01)。结论塞来昔布能有效抑制急性白血病原代细胞分泌VEGF、bFGF,且通过相关分析发现VEGF、bFGF、TGF-β之间具有相关性,说明它们共同参与了白血病血管新生的网络调控系代细胞的生长和增殖,同时针对VEGF、bFGF、TGF-β为靶点进行抗血管新生治疗。因此,本研究表明塞来昔布能够通过抑制白血病血管新生来抑制白血病原疗有望成为白血病患者新的治疗手段。
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