小反刍兽疫活疫苗细胞毒制备工艺及其疫苗评价的研究

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本研究为了探索小反刍兽疫病毒(PPRV)制苗毒株在Vero细胞上毒液制备工艺,首先进行了其生长特性的研究,实验表明:PPRV在Vero细胞上生长良好,致细胞病变(CPE)比较明显,病毒在接种后120~144小时病毒含量达最高值。并且进行了吸附接毒、同步接毒、带毒传代、活毒传代等不同细胞毒制备方法的比较试验,实验结果表明:用吸附接毒和同步接毒方法毒价无显著差异,但同步接毒法在生产工艺将生产周期缩短1-2天,简化了生产工艺流程。   通过对羊一次单剂量、一次3倍剂量接种、单剂量4次重复接种、怀孕羊一次单剂量接种小反刍兽疫活疫苗,经观察未出现临床异常现象,证明该小反刍兽疫活疫苗具有良好的安全性。   对小反刍兽疫活疫苗分别采取2倍剂量、原倍剂量(病毒含量103TCID50/ml)和0.5倍剂量进行免疫羊,结果表明:2ml剂量组的抗体水平≥1:640,1ml剂量组的抗体水平≥1:160,0.5ml剂量组的抗体水平≥1:10,均可达到规程要求,从生产成本和免疫效果考虑,选择接种1ml剂量较为合适。对小反刍兽疫活疫苗进行不同免疫部位试验,结果表明:颈部皮下注射的羊只的抗体水平明显好于尾根皮下注射,所以小反刍兽疫活疫苗的最适免疫方法是颈部皮下注射。   对小反刍兽疫活疫苗免疫后3天、7天、10天、14天、21天、28天进行抗体检测,结果显示:免疫后3天,中和抗体即已产生,随后直线上升,14至21天达到峰值,最高可达到1:10240的水平,随着时间的推移逐渐下降。但仍可维持较长的抗体水平。   通过对小反刍兽疫活疫苗生产工艺和免疫基础的研究,使其为规模化生产提供了质量保证,为我国的小反刍兽疫防控提供了保障。
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