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目的：
本课题将复制硫化氢(H2S)过载的正常和肝硬化大鼠模型，分别在NO、CO抑制及不抑制两种状态下，观察H2S含量过载对肝硬化大鼠门静脉压力的影响及其相关酶学的变化，以探讨内源性H2S在肝硬化门静脉高压中的作用，进一步研究肝硬化发生发展的机制，为肝硬化门静脉高压的临床治疗提供理论基础。
材料和方法：
1.动物分组、肝硬化模型复制及干预剂实施：将72只雌性SD大鼠随机分为肝硬化模型组（40只），正常组（32只）；肝硬化模型组大鼠皮下注射40％四氯化碳棉籽油溶液,首剂0.5ml/100g，后每隔4天注射一次，每次0.3ml/100g，共注射12次，15％乙醇溶液作为唯一饮用液体，并给予高脂高胆固醇饲料。根据预实验肝硬化形成经验（第一次注射起实验第52天形成肝硬化模型）；正常组大鼠同期皮下注射生理盐水，剂量同实验组，采用标准饲料喂养。造模结束后正常组大鼠随机分为4组：正常非抑制（NF）组,正常抑制（NC）组，过载H2S正常非抑制（SF）组和过载H2S正常抑制（SC）组，每组8只；肝硬化模型组随机分为4组：肝硬化非抑制（HF）组，肝硬化抑制（HC）组，过载H2S肝硬化非抑制（SHF）组和过载H2S肝硬化抑制（SHC）组，每组8只；给予过载H2S组大鼠供体硫氢化钠（NaHS）56umol/kg.d-1腹腔注射，NO、CO抑制组大鼠腹腔注射L-NAME: 5mg·kg-1·d-1和ZnPP: 20umol·kg-1·d-1颈部皮下注射,总时间为一周。
2.结果观察：干预结束后，10％水合氯醛麻醉大鼠，应用静脉穿刺针接多导压力换能器测量门静脉压力；测定门静脉血浆中H2S、NO、CO含量；HE染色观察肝脏病理学变化；应用免疫组化法观察肝门区门静脉血管内皮细胞和平滑肌细胞中CSE、HO-1、iNOS、eNOS蛋白表达，并用计算机图文分析系统半定量检测其蛋白表达强弱，灰阶值越低说明表达越强；采用Westblot技术检测肝组织中CSE、HO-1、iNOS、eNOS蛋白表达，用凝胶成像系统对曝光后条带的灰度值进行分析,同时用β-actin校正加样量。实验数据用SPSS16.0统计软件进行分析，作单因素方差分析，用LSD法对多个样本均数进行比较，P<0.05示差异具有统计学意义。
结果：
1.肝硬化大鼠模型复制
通过病理学观察，模型组大鼠肝脏均达到肝纤维化IV级或V级病理阶段，造模过程中大鼠死亡率在正常范围（<20％）。
2.大鼠门静脉压力变化
与NF组相比，HF、HC、SHF和SHC组门静脉压力明显升高（p均<0.01）；与HF相比，HC、SHF组压力均降低（p<均0.01）；SHC组压力低于HC组（p<0.01）；
3.大鼠门静脉血浆中H2S、CO、NO含量变化
与NF组相比，NC、SF、SC组血浆中H2S含量升高（p均<0.05），NO、CO含量均降低（p均<0.01），HF组血浆中H2S含量降低（p<0.01），NO、CO含量均升高（p均<0.01）；
与HF组相比，HC、SHF和SHC组血浆中H2S含量均升高（p均<0.01），NO、CO含量均降低（p均<0.01）；SHC组H2S含量高于HC组（p<0.01），NO、CO含量均低于HC组（p均<0.01）；
4.肝门区门静脉血管及肝组织中CSE、HO-1、iNOS、eNOS蛋白表达
与NF组相比，NC、SF、SC组门静脉血管及肝组织中CSE蛋白表达均增强（p均<0.01），HO-1、iNOS、eNOS蛋白表达均减弱（p均<0.01），HF组肝组织中CSE、eNOS蛋白表达减弱（p<0.01），HO-1、iNOS蛋白表达均增强（p均<0.01），门静脉管壁中CSE蛋白表达减弱（p<0.01），HO-1、iNOS、eNOS蛋白表达均增强（p均<0.01）；
与HF组相比，HC、SHF、SHC组门静脉血管及肝组织中CSE蛋白表达增强（p均<0.01），HO-1、iNOS、eNOS蛋白表达均减弱（p均<0.01）；SHC组CSE蛋白表达强于HC组（p<0.01），HO-1、iNOS、eNOS蛋白表达均弱于HC组（p均<0.01）；
结论：
1.采用复合因素法制备大鼠肝硬化模型成功。
2.H2S-CSE体系在肝硬化模型组中表达下调，而CO-HO-1及NO-NOS体系表达上调；
3.给与NO/CO抑制剂后，大鼠CO-HO-1及NO-NOS体系表达下调，H2S-CSE体系上调，肝硬化门脉高压状态得以缓解，正常组大鼠门静脉压力无明显变化；
4.给予H2S供体后，H2S-CSE体系上调，大鼠CO-HO-1及NO-NOS体系表达下调，肝硬化门脉高压状态得以缓解，正常组大鼠门静脉压力无明显变化；
5.CSE-H2S体系与NOS-NO、HO-CO在肝硬化门脉高压及高动力循环中起着重要作用，可能具有相互负性调节作用。