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藏药“嘎布得罗”为毛莨科翠雀属植物毛翠雀Delphinium trichophorum Franch的干燥地上部位,藏药典籍《晶珠本草》记载“嘎布得罗味苦性凉,治肺热疫毒,为清肺热之甘露,生于高山石隙和阴坡,根黑成束,叶似猛兽爪,茎、花似鸟头,具有镇痛、清热、消炎和杀虫”等功效。生长在海拔2100-4600m的山坡草地,产于青海、西藏东部、甘肃南部及四川西部。毛翠雀作为“嘎布得罗”入药,在《晶珠本草》及《藏药志》都有相关的记载,,上述两部藏药著作中记载的毛翠雀的质量控制主要为原植物鉴定、药材性状鉴别,无基于化学成分的定性鉴别及定量检测项；而翠雀属植物的现代研究,多以化学成分研究为主,迄今未见该属药用植物成分分析及质量评价的研究报道。本论文对毛翠雀药材进行化学成分及质量评价的系统研究。在化学成分研究的基础上,建立毛翠雀药材中生物碱和黄酮类成分薄层色谱指纹图谱及生物碱类成分多指标同时定量分析方法,构建含生物碱类成分和黄酮类成分色谱指纹鉴别图谱及生物碱含量限度的质量评价指标体系。以期能为毛翠雀药材质量标准建立提供科学依据。研究内容包括毛翠雀化学成分的系统分离、薄层色谱指纹图谱鉴别、主要成分的含量测定。研究结果如下：1.运用现代色谱分离方法和波谱技术,从毛翠雀地上部分甲醇提取物的氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位中分离得到24个化合物,鉴定了其中21个化合物的结构,包括13个生物碱,其中11个二萜生物碱：2-氧-11α-乙酰基-13α-异丁酰基海替生碱(2-dehydro-11α-acetyl-13α-isobutyrylhetisine) (DTF-a),2a-苯乙酰基-12β,13α-二羟基德奴定碱(2α-phenacetyl-12β,13a-dihydroxydelnudine) (DTF-b),2α,11α,13β-三乙酰基海替生碱(2α,11α,13β-triacetylhetisine) (DTF-c),2α-羟基-11β-乙酰基-13β-异丁酰基海替生碱(2α-hydroxy-11β-acetyl-13β-isobutyrylhetisine) (DTF-e),海替生酮(heti sinone) (DTF-g),包氏飞燕草碱(browniine) (DTF-h),2α,13α-二乙酰基-11α-羟基海替生碱(2α,13α-diacetyl-11α-hydroxyhetisine) (DTF-q),2α-乙酰基-11α,13β-二羟基海替生碱(2α-acetyl-11α,13β-dihydroxyhetisine) (DTF-r),2α,11α-二羟基-13a-异丁酰基海替生碱(2α,11α-dihydroxy-13α-isobutyrylhetisine) (DTF-s),2α-羟基-11α-乙酰基-13β-异戊酰基海替生碱(2α-hydroxy-11α-acetyl-13α-isovalerylhetisine) (DTF-t),2α-羟基-11β,13β二乙酰基海替生碱(2α-hydroxy-11β,13β-diacetylhetisine) (DTF-u);2个阿朴菲类生物碱：异波尔定碱(isoboldine) (DTF-d)和d-木兰碱(d-magnoflorine) (DTF-p)。1个核苷类：腺苷(adenosine)(DTF-o)。7个黄酮：山奈酚-3-O-β-D-6"-乙酰葡萄糖-7-O-a-L-阿拉伯糖苷(kaempferol-3-O-(6"-acetyl)-β-D-glucopyranoside-7-O-α-L-arabinopyranoside) (DTF-f),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-阿拉伯糖苷(querc etin-3-O-β-D-glucopyranoside-7-O-α-L-arabinopyranoside) (DTF-i),槲皮素(quercetin)(DTF-j),山奈酚-3-O-β-D-6"-乙酰葡萄糖苷(kaempferol-3-O-(6"-acetyl)-β-D-glucopyr anoside) (DTF-k),山奈酚-3-O-β-D-3",6"-二乙酰葡萄糖-7-O-α-L-阿拉伯糖苷(kaemp ferol-3-O-(3",6"-diacetyl)-β-D-glucopyranoside-7-O-a-L-arabinopyranoside) (DTF-1),槲皮素-3-O-β-D-6"-乙酰葡萄糖苷(quercetin-3-β-(6"-acetyl)-β-D-glucopyranoside) (DTF-m),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside) (DTF-n)。其中化合物DTF-a、DTF-b、DTF-e、DTF-q、DTF-s和DTF-t为新化合物,化合物DTF-c、DTF-r和DTF-u为新天然产物；依次对DTF-a、DTF-b、DTF-c、DTF-e、 DTF-q、DTF-r、DTF-s、DTF-t和DTF-u9个化合物进行命名,分别为毛翠雀碱甲、毛翠雀碱乙、毛翠雀碱丙、毛翠雀碱丁、毛翠雀碱戊、毛翠雀碱己、毛翠雀碱庚、毛翠雀碱辛和毛翠雀碱壬。而DTF-d、DTF-f、DTF-1、DTF-m、DTF-o和DTF-p为首次从该属植物中分离得到。从结构上分析,毛翠雀药材中所含生物碱以C-20海替生型二萜生物碱为主,这与翠雀属其他种植物主要含有C-19牛扁碱型和乌头碱型二萜生物碱存在一定的区别；而黄酮都为黄酮醇,都具有山奈酚或者槲皮素结构母核,部分黄酮苷在其糖基上存在乙酰化现象,这与文献报道的该属黄酮类化合物的结构特点相吻合。2.通过化学成分研究发现,毛翠雀中主要含有生物碱类和黄酮类成分。针对这两大类成分,分别建立毛翠雀生物碱类成分及黄酮类成分薄层指纹图谱,以多批次样品中稳定出现的色谱峰构成薄层色谱特征峰,应用CHROMAP1.51旨纹图谱解决方案软件将薄层色谱图像转化成轮廓曲线图并进行相似度评价。与随行对照品进行比较,在生物碱类成分薄层指纹图谱中共指认9个特征色谱峰：毛翠雀碱庚(1#)、毛翠雀碱已(2#)、毛翠雀碱壬(3#)、毛翠雀碱丁(4#)、毛翠雀碱辛(5#)、毛翠雀碱戊(6#)、毛翠雀碱丙(8#),构成了毛翠雀药材生物碱类成分薄层色谱指纹图谱共有模式。样品与共有模式之间的相似度分析结果得出,其中10批样品的相似度在0.8262-0.9806之间,包括9批毛翠雀地上部位和1批叶,相似度高；而茎为0.6608,花为0.6461；根为0.1797,根的相似度小。而蓝翠雀和翠雀不存在与共有模式对应的色谱峰。而在黄酮类成分薄层指纹图谱中共指认8个特征色谱峰：槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-阿拉伯糖苷(1#)、山奈酚-3-O-ββ-D-6"-乙酰葡萄糖-7-O-α-L-阿拉伯糖-苷(4#)、山奈酚-3-O-β-D-3"、6"-二乙酰葡萄糖-7-O-α-L-阿拉伯糖苷(6#),构成了毛翠雀药材黄酮类成分薄层色谱指纹图谱共有模式。样品与共有模式之间的相似度分析结果得出,其中11批样品的相似度在0.9691-0.9964之间,包括9批毛翠雀地上部位、1批叶和1批茎,相似度高。而花的相似度为0.3388,茎为0.5637,相似度较小。而蓝翠雀相似度仅为0.2674,翠雀不存在与共有模式对应的色谱峰。利用毛翠雀TLC指纹图谱可以对毛翠雀不同的药用部位及该属其他种植物进行鉴别,所建立的方法专属性强,可用于毛翠雀的质量控制；为了使实验操作简便易行,建议采用毛翠雀碱戊和毛翠雀碱丁作为生物碱类成分,山奈酚-3-O-β-D-6"-乙酰葡萄糖-7-O-a-L-阿拉伯糖苷作为黄酮类成分定性鉴别的指标性成分。3.采用HPLC-ELSD方法,以乙腈-0.1%三乙胺为流动相进行梯度洗脱,建立毛翠雀药材中毛翠雀碱己(1)、毛翠雀碱戊(2)、毛翠雀碱庚(3)、毛翠雀碱丙(4)、毛翠雀碱丁(5)、毛翠雀碱辛(6)6个二萜生物碱的分析方法,并测定了3种翠雀属药材15批次样品中上述6个指标成分的含量。所测结果为13批毛翠雀样品中毛翠雀碱己(1)、毛翠雀碱戊(2)、毛翠雀碱庚(3)、毛翠雀碱丙(4)、毛翠雀碱丁(5)、毛翠雀碱辛(6)的含量范围分别为：0～0.293 mg·g-1、0～2.866mg·g-1、0.378～2.299 mg·g-1、0.429～3.609mg·g-1、0.363～4.034mg·g-1、0.080～1.126mg·g-1;蓝翠雀和翠雀药材中均没有检测到。对于同一批药材不同药用部位进行研究,测定的6个二萜生物碱在叶、茎、花都能检测到,但其含量存在显著的差异,叶中生物碱的含量之和为11.390 mg·g-1、茎为1.726 mg·g-1、花为10.711 mg·g-1,叶和花中生物碱的含量之和相近,但茎明显较两者少；而根中仅能检测到其中的三个生物碱,且生物碱含量之和仅为0.946 mg·g-1,在4个不同药用部位中最少。同采收年份药材含量比较,08年采自西藏林芝不同地区的4批药材(1-4号)中毛翠雀碱己(1)、毛翠雀碱戊(2)、毛翠雀碱庚(3)的含量分别在0.225～0.293 mg·g-1、 2.164～2.866 mg·g-1、1.847～2.299 mg·g-1之间比09年采自该地区5批药材(9-13号)0.077～0.099 mg·g-1、1.269～1.708 mg·g-1、1.009～1.545 mg·g-1高,生物碱含量之和也略高于09年。由此,为了是实验操作简便易行,同时毛翠雀碱庚、毛翠雀碱丙和毛翠雀碱丁都为新化合物或者新天然产物,专属性强,分离度好,可行性强,建议可采用三者或者其中的化合物作为含量测定的指标性成分。通过上述结果分析,薄层色谱指纹图谱结合多指标成分的含量测定,能够用以鉴别和评价毛翠雀药材的质量。本文对毛翠雀药材化学成分进行系统的研究,结果表明,毛翠雀中主要含有生物碱和黄酮两大类成分,其中生物碱以C-20海替生型生物碱为主,植物进化学对翠雀属的研究表明,若植物类群中C-20类生物碱分布愈多,则该类群愈原始,其进化程度顺序为C-20<C-19<C-18依次递增,因此推测,毛翠雀属于进化中较为原始植物类群,这为植物分类学依据。同时,本文首次从翠雀属植物中分离得到阿朴菲类生物碱和核苷类化合物,丰富了该属植物化学成分类型。在化学成分的研究基础上,建立了毛翠雀药材TLC指纹图谱及HPLC质量评价方法,从整体药材和个体成分两方面对其质量进行分析,为该药的后续质量标准研究提供实验参考依据。