【摘 要】
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目的:应用分子影像学技术建立GFP(green fluorescent protein)标记的小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,为无创、实时和连续研究肿瘤的生长、转移及治疗效果,观察肿瘤血管生成等情况提
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目的:应用分子影像学技术建立GFP(green fluorescent protein)标记的小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,为无创、实时和连续研究肿瘤的生长、转移及治疗效果,观察肿瘤血管生成等情况提供全新的研究方法和思路.方法:在体外将pLEIN-CMV-GFP逆转录病毒载体质粒转入PT67包装细胞,测定病毒滴度,利用逆转录病毒载体pLEIN将GFP报告基因转染入小鼠Lewis肺癌(LLC)肿瘤细胞,并用G418筛选.使GFP在体外稳定高效表达后,收集转染成功的LLC肿瘤细胞以2×10<6>个/ml的细胞悬液0.2ml种植于C57小鼠双侧腹股沟皮下使之生长形成移植瘤.将发荧光的移植瘤组织取下制成单细胞悬液,将4×10<5>个肿瘤细胞/侧继续接种于腹股沟皮下将模型传代,同时接种于C57小鼠前足足垫皮下,并在不同时间对小鼠活体成像,摸索出成像的最佳条件,观察移植瘤的生长及局部血管生成情况,并用病理学证实.结果:在体外通过G418筛选,可以使GFP基因在被转染的肿瘤细胞内获得稳定高表达,将该细胞在小鼠双侧腹股沟及足垫皮下分别接种并形成移植瘤后,可通过光学活体成像仪在活体肿瘤生长早期观察到肿瘤的生长变化及肿瘤血管的生成、发展情况,病理学证实了发光组织与肿瘤组织一致.结论:该模型稳定可靠,能够使我们利用光学分子成像的方法,实时、无创、连续地观察肿瘤生长,并能比以往微血管密度计数更直接地观察肿瘤血管生成,为研究肿瘤提供了新的思路和方法.
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