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重金属污染对农作物的产量和品质产生严重的影响，进而影响国民经济及人体健康。植物重金属抗性机理和分子机制成为研究热点。本实验用重金属胁迫处理水稻幼苗，提取其mRNA，合成双链cDNA。经DNA分级分离处理，获得分子量大于500bp的双链cDNA。利用Gateway技术将得到的cDNA重组到入门载体pDONR222获得初级质粒文库之后，再与目的载体（酵母表达载体）pYES2-DEST52进行重组，获得目的文库。构建的cDNA文库经检测:入门文库滴度为2.4×106cfu/mL，容量为7.2×106cfu;目的文库滴度为3×106cfu/mL，库容量为9×106cfu。平均插入片段长度大于1kb。采用重金属镉敏感的酵母突变株ycflΔ进行筛选，获得能够恢复对镉敏感表型的酵母单克隆。对这些克隆进行质粒提取，经测序分析后，获得的cDNA所对应的单克隆共122个，其中涉及103个不同基因。该文库的构建及初步筛选为研究水稻对重金属镉胁迫应答的分子机制奠定了工作基础。选取OsBBI(Bowman-Birk inhibitors)基因进行进一步功能分析，预测其属于分泌蛋白，实验验证其定位于细胞质以及细胞膜，荧光定量PCR验证水稻根和叶中该基因表达均受镉胁迫诱导。