论文部分内容阅读
洛克沙胂(Roxarsone)是一种有机胂类饲料添加剂，它具有抗菌、促生产、降低料重比、改善动物生产品质、控制球虫病以及肠道寄生虫病的流行等多种作用，近年来在畜牧业尤其是养禽业中应用非常广泛。长期使用或过量添加有机胂制剂对动物有毒性作用，砷在动物体内的残留也直接危害到人类的健康，对有机胂类添加剂的生态环境影响及对人体潜在危害方面的风险评估已引起人们的关注。本论文建立了鸡血浆中洛克沙胂原形的HPLC检测方法、组织(肝脏、肾脏、肌肉、皮脂)中洛克沙胂原形的SPE-HPLC检测方法，以及鸡组织(肝脏、肾脏、肌肉、皮脂)中总砷的微波消解-原子荧光测定法(HG-AFS)，研究了洛克沙胂在鸡体内的药动学以及组织中洛克沙胂和总砷的残留消除规律。 建立了鸡血浆及鸡四种组织中的SPE-HPLC测定方法。血浆样品用甲醇/乙腈混合液(1+1，v/v)提取，经浓缩定容及过滤净化后进行HPLC分析。肝、肾样品用甲醇/乙腈混合液(1+1，v/v)提取；肌肉、皮脂用0.1mol/L pH4.0的NaH2PO4溶液提取，将提取液载入Waters Oasis MAX柱净化，最后经HPLC分析。色谱条件：紫外检测波长224 nm，色谱柱为Thermo C18(5μm，4.6 mm×250 mm)，柱温25℃，血浆测定流动相比例为0.05mol/L pH2.50磷酸二氢钾溶液-乙腈(91:9，v/v)，组织测定动相比例为0.05mol/L pH2.50磷酸二氢钾溶液-乙腈(90:10，v/v)，流速为1.0mL/min，进样体积为20μL。在上述检测条件下能将洛克沙胂与杂质分开。在线性范围内线性良好，相关系数在0.989～0.999，洛克沙胂在血浆中定量限为0.02μg/mL，在组织中定量限为0.1μg/g，各添加回收率和精密度也达到检测要求。 建立了鸡四种组织中总砷含量的微波消解-原子荧光测定方法。样品经过匀浆、加入一定比例的消解液预处理后，置于密闭微波消解系统中设定程序参数进行微波消解，再经赶酸和预还原等前处理步骤后在原子荧光光度仪最佳条件下进行检测。建立的检测方法简单易行，线性范围内线性良好，相关系数大于0.9993；检测限与各添加浓度回收率及精密度等均达到测定要求。 采用已建立的检测方法对50日龄健康岭南黄鸡进行单剂量(10mg/kg)静注和内服洛克沙胂的药动学研究。采用WinNonlin5.2药动学软件的非房室模型统计矩原理分析药-时数据。鸡静注给药后消除半衰期t1/2β为2.37h，表观分布容积Vz为5.29L/kg，药时曲线下面积AUC0-∞为6.55 h·mg/L，体清除率CL为1.56 h。内服给药后消除半衰期为3.02h，1h后达到峰浓度为1.09mg/L，AUC0-∞为2.30h·mg/L，生物利用度F为35.28％。洛克沙胂在鸡体内的药动学特征表现为：静注分布较为广泛，消除迅速；内服给药后，吸收较快但不完全，生物利用度较低。 对鸡连续混饲洛克沙胂(100mg/kg饲料)7天后，在不同时间点宰杀并采集组织(肝脏、肾脏、肌肉及皮脂)，进行各组织中洛克沙胂原形及总砷的残留消除规律研究。停药后各组织中洛克沙胂原形含量均较低；肝脏、肾脏和肌肉中洛克沙胂浓度均在停药后第12h达到最高浓度，洛克沙胂含量大小依次为肝脏>肾脏>肌肉，12h后浓度随即下降，而皮脂中洛克沙胂含量则在停药后第3d到达最高值，3d后浓度也随即下降。停药3d后肌肉中已检测不到洛克沙胂原形，肝脏、肾脏、皮脂在停药10d后亦未检到洛克沙胂原形。肝脏、肾脏中总砷浓度远高于肌肉和皮脂，且肝脏、肾脏都在停药后第12h达到峰浓度，肝脏中总砷浓度高于肾脏，随后便快速下降，7d后浓度趋近平缓。肌肉、皮脂中总砷含量分别在停药后第1d和第3d达到最高值，总体变化趋势较平缓，且始终低于农业部规定的其最高残留限量MRL(以总砷计)0.5mg/kg。肝脏、肾脏中总砷含量在停药后第5d稍高于MRL(以总砷计)2.0mg/kg。采用WinNonLin5.2软件进行非房室模型计算洛克沙胂及总砷的药物浓度-时间数据。肝脏、肾脏、肌肉和皮脂中总砷消除半衰期分别为62.88、80.06、319.34和410.32 h。总砷在皮脂中消除最慢，肝脏中消除最快，各组织胺半衰期大小顺序为：皮脂>肌肉>肾脏>肝脏。肝脏、肾脏、肌肉和皮脂中洛克沙胂原形药物消除半衰期分别为445.13、484.04、391.77和332.45h。洛克沙胂原形在肾脏中消除最慢，皮脂中消除最快，各组织按半衰期大小顺序为肾脏>肝脏>肌肉>皮脂。