数字PCR微滴生成及扩增系统研究

来源 :北京工业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:you0tmd1234
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
数字PCR是一种全新的核酸分子绝对定量技术。作为PCR技术的最新一代,数字PCR技术通过将微量样品作大倍数稀释后进行样品分散,直至每个独立的微量样品中所含有的待测核酸分子数目不超过一个,再将所有样品在相同条件下进行PCR扩增,并对发生了扩增反应的样品逐一进行计数,分别统计带有荧光信号的样本数量和样本总数,根据泊松分布最终实现初始样品核酸分子的绝对定量。数字PCR具有比传统PCR更小的反应体积、更快的反应速度、更低的系统噪声和更高的灵敏度,可以被用于在医学诊断、个体化医疗、食品检验、转基因生物检测、病原体鉴定、免疫分析、法医科学等方面。  本文旨在研发数字PCR微滴生成系统与扩增系统:  1、数字PCR微滴生成系统研究内容包括微滴生成过程仿真、微滴生成芯片设计和微滴生成实验。本文通过数值模拟的方法对微通道内微滴的生成过程进行仿真,分析两相流速(水相和油相)对微滴生成大小和频率的影响。结果表明:(1)当水相流速固定时,随着油相流速的增加,生成微滴的尺寸减小,频率升高;当油相流速固定时,随着水相流速的增加,生成微滴的尺寸增大,频率升高。(2)水相和油相通道宽度为100μm的流动聚焦微通道生成微滴的尺寸和频率可以满足数字PCR微滴生成要求,可以用来生成数字PCR的反应微滴。根据仿真结果进行微滴生成芯片设计,选取PDMS材料采用模塑法完成微滴生成芯片加工。采用加工完成的芯片进行微滴生成实验:生成微滴的体积为0.7nL,生成频率为46个/s,生成微滴半径差异系数小于5%,微滴具有良好的热稳定性,满足系统设计要求。  2、数字PCR扩增系统研究内容包括硬件电路设计、系统底层软件开发和安卓上位机软件开发。硬件电路设计包括温度传感电路设计和半导体驱动电路设计,温度传感电路的探测精度为±0.15℃,半导体驱动电路的驱动能力大于120W。最终实验结果表明:样品池最大升温速率大于4℃/s,温度超调量小于0.3℃,温度稳定时的静态偏差小于0.2℃,满足系统设计要求和相关国家标准。安卓软件能通过蓝牙实时接收温度数据,当温度出现偏差时进行报警,实现了设备的物联网连接。
其他文献
新冠肺炎疫情爆发后,以习近平同志为核心的党中央果断决策,社会各界纷纷响应,齐心协力应对和抗击疫情.社会主义制度的优越性再次被充分彰显,中国共产党坚强的领导力量再次充
期刊
连铸过程中,铸坯的传热及受力情况与铸坯的最终质量密切相关。因此,研究连铸坯的温度场与压下率对连铸生产具有重要的现实意义。本文以西南某厂板坯连铸机为研究对象,进行了
候选分子类药性差是导致药物研发失败的一个主要原因。基于分子的结构及理化性质描述符构建预测模型,有助于提高模型对类药性分子的筛选能力。比较分子场分析(CoMFA)和比较分
高层建筑能够在一定程度上反映出城市的发展程度,当前我国高层建筑逐年增加,其施工水平也在不断提升.桩基础施工是高层建筑工程项目的基础,若施工质量不能满足相关施工规范和
新春伊始,在在神州爆发的新冠肺炎疫情,对国内所有人而言都是一种创伤经验,大家一起集中体验“宅家”隔离、面对每日纷繁的疫情叙事,过分担心疫情防控一线的情况而痛感心有余
期刊
近几年,种植牙进入了科学工作者的视野,而其中最关键的部分就是牙科种植体,因此对牙科植入体材料的开发成为了各科学工作者研究的重点和热点。但是市场上或者实验室研究的一些用
目的 评估胰岛素瘤体素内不相干运动(IVIM)相关参数和CT灌注参数及病理学分级的相关性.方法 前瞻性收集北京协和医院怀疑胰岛素瘤且行IVIM和CT灌注扫描的患者共55例,对图像进
脑磁图(Magnetoencephalography,MEG)是目前最先进的磁源成像技术,它采用低温超导技术,能够实时、无创地测量大脑磁场信号的变化,具有极高的时间分辨率。由于磁场的传播不受介质
对建筑工程而言,深基坑工程的质量优劣关乎建筑工程的质量、安全,基坑支护施工、设计是深基坑工程的关键所在.施工单位应该加强对支护技术方面的研究和创新,结合工程项目实际
现代建筑结构多为混凝土结构,而混凝土的抗压强度检测主要分为动态和静态两种检测方式.而动态主要有振动检测方法,其主要是应用起振器发生共振、脉动作用下,检测建筑主体结构