转基因苹果对微生物群落数量及植株花粉育性影响研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:yunlian123
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随着转基因作物的商品化和种植种类、面积的的不断增加,以及人类安全意识的提高,转基因作物的生态安全问题也越来越引起人们的关注。本试验选用继代保存13年的转CpTI基因苹果组培苗和定植8年的田间转基因植株,研究外源基因在受体植株根系的稳定遗传性;分析外源基因在土壤残留情况;分析外源基因在土壤可培养微生物存在情况;研究转基因植株对根际微生物的影响;本实验室研究发现转基因苹果花粉离体萌发率和花粉生活力都显著低于非转基因苹果,本试验通过显微观察转基因苹果花粉形成过程,探索导致以上现象的原因。主要研究结果如下:1对继代培养13年的嘎拉、王林、富士共129株转CpTI基因苹果组培苗的根系进行PCR检测,结果表明:129株组培苗的根系均扩增出了CpTI特异基因片断,说明外源CpTI基因在转基因苹果组培苗根系形成过程中,没有发生丢失。2对定植田间8年的8个株系的转CpTI基因苹果的根际土、根围土、表层土进行PCR检测,结果表明:转基因苹果根际土和根围土全部检测到了CpTI基因;转基因苹果的表层土的2个株系检测到了外源CpTI基因,说明外源CpTI基因在转基因植株根系土壤存在残留。3培养检测到外源基因的表层土、根围土、根际土的微生物,得到262株细菌、189株放线菌和146株真菌,对其进行PCR检测,所有可培养细菌、放线菌和真菌均没有检测到外源CpTI基因。4用无菌蛭石:草炭(1:1)的基质,加入微生物菌肥,统计栽种30d、60d和90d的转基因苹果(嘎拉、王林、富士)根际土细菌、放线菌和真菌的数量,结果表明:30d时,转基因苹果根际土细菌、真菌数量显著高于对照;60d时,转基因苹果根际土真菌数量显著高于对照,转基因王林细菌数量显著低于对照;90d时,转基因富士真菌数量显著高于对照,转基因苹果细菌数量与对照差异不显著;转基因苹果根际土放线菌数量与对照差异均不显著。5三月中旬至四月上旬,每隔3d采集转基因苹果的花蕾(花芽),采用石蜡切片法,显微观察花粉形成过程,结果表明:在花药发育初期,造孢细胞与花粉囊壁部分分离,导致花粉发育中营养缺乏,是后期花粉离体萌发率、生活力较低的原因。
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