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肝癌是一种原发于肝脏的恶性肿瘤。目前治疗肝癌的药物大多具有较大的毒副作用，因此，寻找敏感性高且毒副作用小的肝癌治疗药物具有重要的意义。实验室前期研究发现鳄胆汁提取物能将肝癌细胞SMMC-7721周期阻滞于G0/G1期进而诱导其凋亡，但作用机制尚未阐明。
本论文以体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721为对象，深入探讨鳄胆汁提取物抑制肝癌发生发展、侵袭转移的分子机理。荧光定量PCR、Western blot发现，鳄胆汁提取物能明显抑制肝癌细胞SMMC-7721的bcl-2、c-myc、survivin、hTERT致癌基因的表达，提高bax、p53、caspase-3抑癌基因的表达。结合本实验室前期实验结果提示，鳄胆汁提取物诱导细胞内ROS的升高，bax/bcl-2比例上升导致线粒体膜通透性增加，凋亡因子释放。进而激活Caspase级联反应，介导了p53、c-Myc、survivin参与的细胞凋亡过程。
鳄胆汁提取物作用于SMMC-7721细胞前后，细胞的全蛋白表达谱发生改变。蛋白双向电泳和质谱分析共鉴定了21种表达差异的蛋白，其中PCNA、STMN表达显著下调。RT-PCR、Western blot实验证明，鳄胆汁提取物在转录和翻译水平上抑制了PCNA、STMN的表达。本论文运用short hair RNA干扰技术及慢病毒转染法构建了特异性干扰STMN的稳定细胞系SMMC-7721-shSTMN和非特异性干扰的稳定细胞系SMMC-7721-shCtrl。后续研究发现STMN干扰的SMMC-7721-shSTMN组增殖速度显著低于对照组。综上所述，STMN可能是鳄胆汁提取物抑制肝癌细胞生长的分子靶点之一。
另外，本文从体外细胞实验研究了鳄胆汁提取物对肝癌细胞SMMC-7721的黏附、迁移和侵袭能力的影响。细胞黏附、划痕、Transwell等实验检测发现鳄胆汁提取物能抑制肝癌细胞SMMC-7721的体外黏附、迁移和侵袭能力。Real-timePCR、Western blot、明胶酶谱法等方法研究表明，鳄胆汁提取物鳄胆汁提取物通过抑制细胞中金属蛋白酶(MMP)-2、9的表达和酶活性，降低细胞的黏附、迁移和侵袭能力。
对鳄胆汁提取物抗癌作用机理的研究，不仅为其抗肝癌作用靶点的阐明提供新的思路和线索，也为肝癌的药物开发及临床应用提供基础理论支持。