汕尾地区甲型H1N1猪流感病毒监测及实时PCR方法建立

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猪流感(Swine influenza,SI),又称猪流行性感冒,是由正粘病毒科A型流感病毒属的猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)引起的猪的一种急性、热性和高度接触性传染病。临床上表现为不同日龄、性别和品种的猪都易感,以突发高热、咳嗽、呼吸困难、衰竭、高发病率、低死亡率为主要特征。虽然SIV引起的死亡率很低,病猪也可迅速康复,但会导致猪只增重受阻,肉料比降低,生产性能下降,对养猪业造成极大的危害,同时也具有非常重要的公共卫生意义。2009年3月爆发于墨西哥地区的甲型H1N1流感疫情迅速向全球蔓延,仅仅4个月的时间全球主要城市己报道确诊病例2万多例。引起本次疫情的病源是一种新型猪源H1N1亚型流感病毒,其基因源于人、欧洲猪和禽类流感病毒的混合体,是一种多元重组病毒。  为了解近年来广东省汕尾地区甲型H1N1猪流感病毒的存在和流行情况,以便做好防控工作,本研究对2009年~2011年汕尾不同地区的猪场进行了10020份猪鼻拭子样品的采集并进行了检测,其中检出1例疑似病例,对该猪场进行全面抽样复查后检测结果为阴性,说明汕尾地区还没有发现大规模的甲型H1N1猪流感病毒存在。虽然汕尾地区未发现甲型H1N1猪流感阳性病例,但广东地区作为流感的多发地,而且面对全球猪流感疫情日益复杂及大量基因重配型病毒的出现,长期地做好猪场的疫情监测和疫病防控措施是必不可少的,同时也可以为我国流感防控工作提供科学依据。  此外,近年来猪流感病毒不断有新亚型的出现。为快速准确分离鉴定H4亚型猪流感,本研究建立了H4亚型猪流感的荧光定量检测方法,结果最低检测病毒拷贝数为1.0×101拷贝/μl,并且各个稀释度的扩增曲线显示出良好的重复性,Ct值变异系数(CV)在0.17%~1.41%之间,能特异性检测到H4亚型猪流感病毒,和其它几种猪的常见病毒病无交叉反应,表明本检测方法稳定性非常好,同时该方法还具检测灵敏度高,特异性好,简便、快速、高通量等优点,适于临床分离鉴别H4亚型猪流感病毒。
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