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肠致病性大肠杆菌是能引起动物体内出血性和非出血性腹泻、出血性结肠炎和溶血性尿毒症的主要病原菌。最常见的菌株是o45，而o45的一个重要毒力特征是引起肠黏膜粘附和脱落损伤(A/E)，EPEC的主要毒力因子定位于致病岛(PathogenicityIsland，PAIs)和肠细胞脱落位点(The Locusofenterocyte effacement，LEE)上，其DNA长度为43kp，分LEEl，LEE2，LEE3，和LEE4四个基因区，LEEl包含ler(中心调节基因，LEE-encodedregulator)，ler对LEE毒力基因群(LEE2、LEE3和LEE4)的表达起正调控作用，因此认为ler是EPEC毒力因子表达重要的中心调节基因。
在本研究中，构建了045的ler基因缺失突变菌株并对其特性进行了研究：首先用PCR的方法扩增出缺失279bpler的基因片段，将其克隆到自杀性载体pCVD442中，构建了重组质粒pCVD442：：△ler，转化到宿主菌SM10pir，然后通过接合性转导的方法将自杀质粒pCVD442：：△ler从SM10pir转到0157：H7中，转导子过夜培养后铺平板，通过蔗糖筛选氨苄敏感的ler基因缺失突变菌株，并用PCR进行鉴定。用045(△ler)细菌培养上清进行Vero细胞毒性实验，结果表明045ler基因缺失突变菌株对Vero细胞没有毒性作用，而野生型045对Vero细胞具有较强的毒性作用。为了评价045(△ler)突变菌株的安全性，建立了045感染的小鼠动物模型，对第一组小鼠口服接种045(△ler)，同时对第二组同龄小鼠口服接种野生型045。第二组小鼠体重减轻，并于4天内全部死亡，剖检及病理切片检查肾脏、肝脏、肺脏和肠均出现明显病理变化。第一组小鼠生长正常，体重与阴性对照组小鼠相似，没有出现任何临床症状，14天后剖检，各器官均未见病理变化。结果证实所构建的EPEC045ler基因缺失突变菌株无致细胞病变作用，并丧失了对小鼠动物模型的致病性，该菌株有可能成为预防猪EPEC045感染的基因工程弱毒菌苗候选株。