【摘 要】
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目的：腺病毒是一种无包膜的双链DNA病毒，人腺病毒(HAdV)包括A～G七个亚属55个血清型，能引起不同器官的多种疾病。在正常人群中，腺病毒感染能引起呼吸道疾病、结膜炎、胃肠炎、出血
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目的：腺病毒是一种无包膜的双链DNA病毒，人腺病毒(HAdV)包括A～G七个亚属55个血清型，能引起不同器官的多种疾病。在正常人群中，腺病毒感染能引起呼吸道疾病、结膜炎、胃肠炎、出血性膀胱炎等。目前尚无有效的抗腺病毒治疗药物和腺病毒疫苗可用，因此开展防治腺病毒感染的研究具有重要的意义，本文对黄芪甲苷抗腺病毒作用及分子机制进行了研究。
方法：采用细胞病变抑制实验(CPE)和噻唑蓝(MTT)比色法观察黄芪甲苷对人腺病毒3型(HAdV3)的抑制作用、利用实时荧光定量PCR观察黄芪甲苷对病毒复制作用的影响、利用激光共聚焦显微镜观察黄芪甲苷在合成阶段对病毒的作用效果、利用Hoechst33342/PI双染观察病毒感染细胞不同时间点细胞凋亡和坏死的变化、利用流式细胞仪观察病毒感染.A549细胞后细胞凋亡率的变化及黄芪甲苷对细胞凋亡率的影响、Western blot法检测黄芪甲苷对细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响。
结果：(1)细胞病变抑制实验及MTT结果显示黄芪甲苷在三种作用方式(直接灭活阶段、病毒复制阶段、病毒吸附阶段)下能够抑制腺病毒生长，病毒抑制率与药物浓度呈正相关，黄芪甲苷对A549细胞无保护作用，不能阻断病毒进入细胞。(2)实时荧光定量PCR结果显示黄芪甲苷能够抑制腺病毒核酸复制。(3)激光共聚焦显微镜荧光定量分析证明黄芪甲苷在合成阶段对腺病毒有抑制作用。(4)Hoechst33342/PI双染结果显示病毒感染细胞48h，凋亡细胞明显增多。(5)流式细胞仪检测显示腺病毒感染A549细胞诱导细胞凋亡，黄芪甲苷对腺病毒感染引起的A549细胞凋亡具有抑制的作用。(6)黄芪甲苷组(除细胞保护作用方式)与病毒组比较Bcl-2蛋白的表达明显升高、Bax蛋白和Caspase-3蛋白的表达明显降低。
结论：黄芪甲苷具有抗腺病毒作用，作用方式主要是对病毒的直接灭活作用、抑制病毒复制和病毒吸附的作用，但对宿主细胞无保护作用。在三种作用方式下，黄芪甲苷抗腺病毒作用可能与减少细胞凋亡、调节Bcl-2蛋白、Bax蛋白和Caspase-3蛋白的表达有关。本次研究结果为研发天然、高效、低毒的抗腺病毒的药物提供了科学依据，为植物药的开发和利用，促进我国经济植物的研究与利用提供了新的思路。
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