论文部分内容阅读
背景:瘙痒是一种非常不舒服的感觉,能引起机体反复抓挠。瘙痒不仅常见于各种皮肤病患者,也常见一些系统疾病的并发症。患有瘙痒症的病人经常感觉阵发性全身瘙痒,会情不自禁地抓挠,影响患者工作和生活质量。迄今瘙痒的机制还不清楚,所以临床上缺乏有效的治疗瘙痒的药物。苦参是豆科植物苦参(SophoraFlavescensAit)的干燥根,具有清热、杀虫止痒、祛湿等功效。苦参的甲醇提取物能明显减少五羟色胺诱导的小鼠搔抓反应。苦参被用于治疗瘙痒有较长的历史,且效果显著,但苦参的止痒机制并不清楚。我们选择了苦参中含量较高的活性生物碱—苦参碱展开研究,苦参碱对过敏接触性皮炎(ACD)诱导的慢性瘙痒有明显抑制效果,这也提示了苦参碱具有止痒作用;但苦参碱止痒机制尚未清楚。目的:证实苦参碱的止痒作用,并试图阐明苦参碱的止痒机理。实验方法:(1)应用动物行为学实验验证苦参碱的止痒效果;(2)采用原代细胞培养、电生理技术研究苦参碱对背根神经节(DRG)神经元上离子通道的影响(电压门控的钠通道、钾通道和钙通道);(3)利用钙成像技术研究苦参碱抑制氯喹和组胺诱导的反应;(4)使用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法,检测不同浓度苦参碱对DRG神经元和HEK293细胞活性的影响;(5)通过脊髓切片培养并结合电生理记录技术,研究苦参碱如何影响脊髓背角神经元的突触信息传递。结果:(1)动物行为学实验发现苦参碱不但抑制组胺、氯喹和化合物48/80引起的急性抓挠反应,而且也抑制干皮症和过敏性皮炎诱发的慢性瘙痒,这种抑制作用具有浓度依赖特性。(2)DRG神经元电生理结果显示苦参碱能改变DRG神经元的兴奋性,表现出苦参碱能抑制持续型电压门控钾通道电流和抑制高电压激活的N型钙通道电流,但不影响电压门控钠通道电流。(3)钙成像实验结果显示苦参碱并不影响氯喹和组胺引起的钙离子内流反应。(4)MTT实验表明高浓度的苦参碱(10mM)对DRG神经元和HEK293细胞没有毒性作用。(5)苦参碱能有效抑制脊髓背角Ⅱ神经元突触前膜兴奋性神经递质的释放,但不影响突触后膜兴奋性受体功能。结论:苦参碱能有效抑制急性和慢性瘙痒,其机制之一是通过抑制突触前N-型钙通道,影响外周DRG到脊髓的突触传递。意义:本研究为明确瘙痒形成机制和临床止痒新药的研发提供新的思路。