【摘 要】
：
我们从本实验室构建的家蚕蛹cDNA文库中发现了一条cDNA序列(基因登录号为FJ602790)，该序列是由3个外显子，2个内含子剪接而成。序列比对后发现其ORF为39.bp，编码132个氨基酸残基
论文部分内容阅读
我们从本实验室构建的家蚕蛹cDNA文库中发现了一条cDNA序列(基因登录号为FJ602790)，该序列是由3个外显子，2个内含子剪接而成。序列比对后发现其ORF为39.bp，编码132个氨基酸残基。将推测的氨基酸序列进行同源性(BlastP)比对，发现此蛋白序列含有两个TH.(Thymosin)保守结构域，属保守假定蛋白，因此将其命名为BmTHY，生物信息学预测其分子量为14.74kDa，等电点为4.83。
我们利用大肠杆菌表达系统成功表达了含有His标签的BmTHY融合蛋白，预测分子量合计为18.4kDa，主要以可溶形式存在于上清中，用N.Sepharos.6Fas.Flow亲和层析柱纯化融合的目的蛋白，经FPLC反相柱层析进一步纯化，进行质谱分析，得到该融合蛋白的分子量为18.409kDa，证实了该蛋白表达的正确性。用得到的纯化融合蛋白为抗原免疫新西兰白兔，制备该融合蛋白的多克隆抗体。ELISA检测该抗血清(多克隆抗体)的效价可达到1:25600以上。用制备的多克隆抗体进行Wester.blotting检测发现，BmTHY蛋白在家蚕五龄幼虫组织中的卵巢，头，皮均有表达，在蛹和蛾的发育阶段有表达。荧光定量PCR的结果表明，家蚕BmTH.mRNA在家蚕的各个发育时期及不同组织中广泛存在，其中在家蚕的各个发育时期中，蛾的表达量较高，卵的表达量较低；在五龄幼虫的头、卵巢、中肠、马氏管、气管、表皮、脂肪体，丝腺等组织中BmTHY的mRNA含量依次减少。用免疫荧光的方法对家蚕的Bm5细胞进行亚细胞定位时发现，BmTHY蛋白主要存在于细胞核中，胞质里含量较少。此外我们还用MTT的方法检测了融合蛋白BmTHY对Hela和Spcal两种肿瘤细胞增殖的抑制活性，发现浓度为140μg/ml的BmTHY对Hela细胞在72小时时抑制率可达到29％，但对Spcal细胞则没有明显效果。
其他文献
超纯煤是高新洁净煤技术研发的重要基础原料之一.为实现超纯煤物理分选技术的突破，在冲击式粉碎分级装置上，研究了分级机转速对太西无烟煤粉体粒度及灰分分布影响规律研究
水泥基材料的裂缝及其修补技术是关系到现代混凝土抗裂性能、耐久性以及裂缝或损伤修复的重要课题,也是多学科交叉的综合性课题,水泥基材料的收缩开裂及自愈合效应(Shrinkage
马铃薯（Solanum tuberosum L.）是茄科茄属草本植物，是世界性的经济和粮食作物，也是我国西北地区的优势特色资源作物。随着马铃薯主粮化战略的实施，需要加工贮藏的马铃薯数量不断增
低空无人机航摄遥感系统的推出，使其快速在应急测绘、小城镇、新农村规划和困难地区测绘中占有一席之地，并发挥了巨大的作用。本文就无人机技术在矿区建设及规划中的应用做
本文针对大柳煤矿选煤厂煤泥处理系统的实际情况,分析煤泥回收工艺存在的问题,通过对原煤中的煤泥及-1.0 mm煤泥含量的筛分试验,提出了采用高频筛回收0.5~1.0 mm的粗煤泥的改
冷水河流域地处陕西省南部、米仓山主脊以北南郑县,为汉江一级支流,流域面积641.41km2。冷水河流域北部为汉中盆地南缘,南部为巴山系米仓山,地势由北向南呈阶梯状抬升,依次为
斯达油脂酵母(Lipomyces starkeyi)能利用多样的碳源发酵产生油脂,其油含量达到细胞干重的60%以上,油脂的脂肪酸组成与植物油类似,有望替代植物油作为生物柴油产业的新原料。近年来利用斯达油脂酵母发酵生产生物柴油受到了广泛的关注,但是目前利用斯达油脂酵母发酵存在油脂产率和培养条件不稳定的问题。本研究调查了斯达油脂酵母对不同碳源(包括葡萄糖、木糖、甘油和柳木木屑水解液)的发酵以及在葡萄糖
为了探讨冷蒿与家畜采食量的关系,本实验以绵羊为研究对象,用含有不同比例冷蒿的混合牧草饲喂绵羊,分析了绵羊的采食量、采食行为及食性选择策略,结合热脱附―气相色谱―质谱
用灌浆的方法处理堤坝坝体的渗漏，已有几十年的历史。特别是近年来，在坝体灌浆机理研究方面有了长足的进步，并将理论成果用于实践，创造了更多更好的实践经验。迄今为止，全国已有近
屯兰选煤厂目前采用快速定量装车系统，由于所处地理位置属我国北部，每年冬季，列车装煤时必须喷洒防冻液，以确保煤炭在运输过程中不发生冻结事故。该厂使用的喷洒系统是本单位