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利用免疫亲和固相萃取检测小分子化合物的方法研究及其应用
海洛因和吗啡是目前滥用范围最广的毒品，睾酮和表睾酮作为一种兴奋剂经常被运动员滥用。由于它们在体内的含量低，而且基体又非常复杂，而且干扰组分很多，对于分析检测来讲是一个很大的挑战。因此一般都必须经过一定的前处理后才能进行下一步的分析。而免疫亲和萃取就提供了一种高特异性和高选择性的前处理方法。免疫亲和固相萃取是将免疫亲和色谱技术应用于固相萃取柱上，利用抗原抗体之间所特有的高特异性、高亲和性的特点，将目标化合物与复杂的基体和非目标化合物分离，并且通过浓缩重新定容而得到富集，从而提高了分析的灵敏度。
本论文在本课题组已有的研究工作基础上，建立了离线免疫亲和萃取与高效液相色谱或高效液相色谱/质谱联用检测尿液中的海洛因和吗啡的代谢物以及尿液中睾酮和表睾酮的分析方法。本论文主要分为以下几个部分：
第一章：综述了免疫亲和萃取的研究进展，介绍了免疫亲和萃取的基本原理、固定化方式、与其它技术的联用以及应用。
第二章：离线免疫亲和萃取与高效液相色谱及高效液相色谱/离子阱质谱联用检测尿液中海洛因及吗啡的代谢物：以溴化氰活化的Sepharose4B为基质制备了吗啡的多克隆抗体免疫亲和萃取柱，通过萃取步骤捕获了掺杂尿液中的海洛因及吗啡的代谢物-吗啡和6-MAM，最后浓缩定容。用两种仪器方法-高效液相色谱仪和高效液相色谱/质谱联用仪通过掺杂尿样对该方法的日间精密度和日内精密度进行了考察。
第三章：利用离线免疫亲和萃取与高效液相色谱联用检测尿液中的表睾酮：以溴化氰活化的Sepharose4B为基质制备了表睾酮的单克隆免疫亲和萃取柱，并且对该免疫亲和柱的特异性进行了表征，从方法学上考察了方法的日间精密度和日内精密度。同时利用离线免疫亲和萃取与高效液相色谱联用检测了实际尿样中表睾酮的含量和进行了回收率实验。
第四章：利用离线免疫亲和萃取与高效液相色谱联用检测尿液中的睾酮和表睾酮：以溴化氰活化的Sepharose4B为载体制备了睾酮针对3位和17位两种不同位点的多克隆抗体-3位多克隆抗体和17位多克隆抗体的免疫亲和萃取柱。分别对这两种抗体和免疫亲和萃取柱进行了表征。并且尝试在3位多克隆抗体免疫亲和萃取柱进行可掺杂尿样的回收率实验。